植物遗传工程 三、高等植物遗传工程的实验体系.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing) 4(5)： 41--431982 讲 座 植 物 遗 传 工 程 三、高等植物遗传工程的实验体系 彼得 ·卡尔逐 美（国密执安州立大学土壤和作物科学系） 关于高等植物遗传工程实验体系可以分作四个方 对植物还只能根据肉眼可见的差别来筛选突变休。早 面来阐述，即：如何建立高等植物遗传工程实验体系； 在1930年，当真菌和细菌的遗传学已开始开展生化遗 已建成的实验体系的两个实例；植物遗传工程实验体 传学研究时，筛选植物突变体还是在观察花的颜色。 系的实际应用；存在的问题。 由于植物的生化代谢途径与微生物有所不同，不能将 （一）如何建立高等植物遗传工程的实验体系 微生物的筛选体系直接用于植物，因此，应该设计出适 微生物遗传工程的成就向人们展示了基因操作在 用于高等植物的化学筛选体系。 改造生物方面的重大意义，同时也提供了一套完整的 总之，只要能得到高等植物单倍体细胞的悬浮培 实验技术。高等植物和微生物之间差别很大，这就要 养物，我们就能解决植物遗传工程中遇到的上述问题。 求我们首先对微生物实验体系的主要特点进行分析， 通过细胞悬浮培养，不仅能得到很大群体的单倍体细 然后结合高等植物的特点，找出建立具有微生物实验 胞，可以用这些细胞 而（不再是用整个植株）作为实验 体系主要特点的高等植物遗传工程实验体系的门径。 材料，而且这些单倍体细胞也基本上是纯合的，可以用 在这里需要着重提到四点。 化学筛选剂在细胞水平上进行处理与筛选。 大约在 第一，单倍性。微生物是单倍体，而高等植物一般 12-13年前才开始将植物细胞培养用在遗传操作方 是二倍体或倍数更高。隐性突变在单倍体中是能够表 面。在那以前，植物细胞培养只是植物生理学家研究 达的，但在二倍体中，由于被野生型的等位基因所掩 不同植物激素规律的实验体系。许多知名的学者，如 盖，一般则不能表达，因此也就不能被筛选出来。所 Steward,Skoog和Street等，在植物细胞培养方面，有 以，用于建立高等植物遗传工程实验体系的材料最好 过重大贡献。我们能用植物细胞作为遗传体系是与前 是单倍体。 人取得的成就分不开的。 第二，群体的大小。微生物的群体大，在1ml的溶 二（）已建成的实验体系的两个实例 液中可以有 10’个细菌。供筛选的群体愈大，筛选出 第一种实验体系是用从烟草的二倍体植株取来的 预期突变体的机会也就愈多。就高等植物而言，即使 花药，经离体培养，诱导成单倍体植株。尔后，从单倍 是小到一粒种子，也是很大的，在 lml的溶液中只能 体植株的任何一部分取下组织，在含激素的培养基上 容下一粒玉米种子。在美国，通常玉米的大田种植密 诱导出单倍体愈伤组织。将这些单倍体愈伤组织转移 度大约是每英亩 10’株。若是按数量计算，Iml溶液 到液体培养基中进行悬浮培养，即可获得 1ml培养液 中的细菌数就相当于一万英亩土地上的玉米植株数， 中有 106个单细胞的细胞群体。这些烟草细胞一般来 可见两者群体大小的差异是很大的。欲建立的植物实 说基本上是纯合的，可以用来进行诱变。改换培养基， 验体系也应具有密度大体积小的特点。 使突变体细胞能形成愈伤组织并分化出芽与根，成为 第三，纯合性。同一群体中的细菌是纯合的，因此 单倍体植株，再用秋水仙碱处理，即可产生完整的二倍 细菌的基因随时都能表现。高等植物则不然，即使是 体