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遗传 HEREDITAS(Beijing)17(3):39-411995 葡萄花药三倍体植株的倍性鉴定① 李 唯 曹孜义 张利平 甘（肃农业大学农学系，兰州 730070) 摘 要 用卡宝品红染色法检查格列那什二倍体葡萄V（itisviniferavar.Grenache）花药再生植株的染色 体，并用UNICHRO软件对其数目及长度进行了测量．结果表明，这些花药植株根尖中染色体组型为 2n=3x=57的细胞平均占观察细胞总数的86.5 ，来自不同花药的再生植株均为三倍体．讨论了这些植 株的可能来源． 关键词 葡萄，花药培养，三倍体植株，染色体分析，UNICHRO软件 AppraisalofPloidyforTriploidPlantsRegeneratedfrom AntherCultureofVitisviniferavar.Grenache LiWei CaoZiyi ZhangLiping (DepartmentAgronomy,GansuUniversityofAgricu)ture,Lanzhou730070) AbstrartThechromosomenumberintheroottipoftriploidplantsregeneratedfromanthercultureof diploidVitisviniferavar.GrenachewereexaminedwithCarbolfuchsinstainingmethodandthelengthof chromosomesweremeasuredwithUNICHROpackage.Theresultsshowthattheaveragepecentageof cellswhichhaveakaryotypefor2n=3x＝57inroottipofpollenplantswere86.5% inthetotalnumber ofcellsobserved,theplantsregeneratedfromdifferentanthersaretriploid.Theirpossibleoriginisdis- cussed. Kevwords Grapevine.Antherculture,Trlploidplant,Chromosomeanalyse,UNICHROpackage 葡萄的染色体数目多而小，要准确地计数常常是困难的。多年来虽有一些报道，但方法较为 复杂 23〔)，而且效果也并非十分理想。葡萄花药培养研究已有二十多年历史．在花药培养中，由于 培养条件和培养基中外源激素的影响，一些特殊的遗传变异如体细胞的多极有丝分裂、异常小抱 子以及核内染色体复制和核融合等多有发生 2,〔4,10,25)，这些变异常常会使再生植株的来源变得较 为复杂，然而，只有来自花药小抱子的再生植株才能成为育种中所需要的纯合体。因此，如何能准 确地鉴定花药再生植株的细胞倍性，对于确定再生植株的利用价值有重要意义．迄今，葡萄花药 培养除一例获得单倍休植株外 〔〕“，其它所有研究获得的再生植株均为二倍体 1,〔13,14,19,20)．本文 报道了从二倍体格列那什葡萄(Grenache)花药培养中获得三倍体再生植株倍性鉴定及其分析的 初步结果。 ①德国栽培植物育种研究中心BAZ质量分析研究所的R.Ahna博士和H.U.Haas先生帮助进行格列那什三倍 体花药植株的染色体分析，特此致谢． 40 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1995 17卷 I材 料 与 方 法 实验以采自中国农科院郑州果树所葡萄品种园中的格列那什 V（itisviniferaL.Grenache)二倍 体葡萄的花药再生植株为材料，在花药培养 80天以后，将第一批由花药愈伤组织胚状体形成的小 植株转移到增殖培养基上(1（／2B5+0.IppmIAA+1.5％蔗糖），在28℃和3000Lx连续光照下培养 10-15天，待新根长出至1.0-1.s厘米长时，于上午10-11时剪取约0.5厘米长的根尖，置于饱 和对二氯苯或4℃的冷水中处理6-24小时，再经卡诺固定液酒（精：冰醋酸为3:1)固