海南和两广地区柱花草炭疽菌遗传多态性RAPD分析.pdfVIP

植物学通报Chinese Bulletin of Botany 2007, 24 (2): 173 180, .实验简报. 海南和两广地区柱花草炭疽菌遗传多态性的RA PD 分析 1 1 2 3, 4* 史学群 , 宋海超 , 张欣 , 易克贤 1 海南大学生命科学与农学院, 海口 570228; 2 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所, 儋州 57 1737 3 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室, 海口 57 110 1; 4 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所, 湛江 52409 1 摘要 利用8个随机引物对来自海南、广东和广西的114个柱花草胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)的菌株进 行了随机扩增多态性DNA(RAPD)分析, 扩增谱带大小0.2-3.0 kb。8个随机引物中以CW 38 114扩增的谱带重现性和稳定性 最好, 共扩增出786条谱带, 其中多态性谱带558条。供试菌株扩增图谱在260-650 bp处有3条明显的共同特征谱带, 在650- 3 000 bp之间的谱带显示较大的多态性差异。聚类结果表明: 供试菌株主要分为四大遗传类型, 其中第I类和第III类有两个亚 类; 三省区的菌株遗传多态性丰富程度依次为海南广西广东, 并表现出地区性分布差异。研究结果还表明柱花草炭疽菌株 表现出一定程度的专化寄生性。 关键词 胶孢炭疽菌, 随机扩增多态性DNA , 柱花草 史学群, 宋海超, 张欣, 易克贤 (2007). 海南和两广地区柱花草炭疽菌遗传多态性的RA PD 分析. 植物学通报 24 , 173-180 . 柱花草( S t y l o s a n t h e s s p p . ) 又名笔花豆 1962 年我国开始从马来西亚系统引入柱花草。据 (penciflower),是全球热带地区栽培面积最大、应用最 冯淑芬(1994)在1987-1989 年对海南、广东和广西3 广泛的优良豆科牧草, 除广泛用作牧草供放牧和生产优 省区11个市县的主要柱花草种植区的调查结果显示, 各 质干草及草粉外, 还可作为绿肥和幼龄胶园、果园的覆 地均有炭疽病分布。此后, 易克贤等(2001, 2003)对我 盖作物以及水土保持植物。 国广东、广西和海南3 省的14 个主要柱花草生产市县 柱花草炭疽病(stylo anthracnose)是目前严重影响 再次进行了调查, 发现我国柱花草同时存在A 、B 两种 柱花草生产和推广的主要病害, 在全球柱花草种植区均 专化型, 而在我国危害较大的是B 型胶孢炭疽菌。 有分布。该病主要由半知菌亚门刺盘孢属的胶孢炭疽 由于不同柱花草胶孢炭疽菌株菌丝体和分生孢子表 菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起。柱花草炭疽 型培养特征高度相近, 因此利用传统的形态标记和经典 病主要危害植株叶、茎并具有再侵染特性, 使牧草叶片 遗传标记很难对其进行分类鉴定。而分子标记技术的 变黄、坏死并脱落, 茎、叶柄和顶芽枯萎, 花序败落 产生和发展为从基因组DNA 分子水平上进行柱花草炭 不结籽, 严重时能使幼苗和整个成株死亡, 造成牧草产 疽病原菌株的遗传分析提供了便捷的手段。特别是 量和种子产量锐减, 甚至绝收。研究表明, 柱花草炭疽 RA PD技术, 由于其简单易行, 成本低, 分析大量样本速 菌具有丰富的生物多样性和遗传变异性, 许多抗病品种 度快, 近年在研究植物病原真菌的群体遗传特别是种内 使用几年之后便丧失原有抗性。国内外生产实践证明, 遗传分化上, 显示了独特的优越性而得到广泛应用 一个抗病的柱花草品种使用10年后就会变成感病品种, (Munaut et al., 1998; 陈亮等, 2000; 易克贤等, 2003; 即品种寿命一般只有10 年左右。因此深入进行柱花草 桂秀梅等, 2005; 郭宏波等, 2005) 。 炭疽病病原生物学和遗传学研究, 加速培育柱花草抗炭 本研究是在易