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植物生理学报 PlantPhysiologyJournal2011，47(12)：1161-1166 1161
山葡萄谷胱甘肽 转移酶基][(VAmGST4)克隆及表达分析
刘海峰 ，王军
中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄与葡萄酒研究中心，北京1o0083；延边大学农学院，吉林延吉133000
摘要：采用RT-PCR和SMARTRACE技术克隆了山葡萄 G 基因的全长cDNA序列，GenBank登录号为FJ645770，基因
全长885bp，包括开放阅读框(ORF)642bp，编码213个氨基酸。该基因表达产物相对分子质量为24．24kDa，等电点为5．72，
是不稳定蛋白；该基 因属于GST超基因家族，不包含信号肽。氨基酸序列与欧亚种葡萄(AY971515)、荔枝(EF613493)、矮
牵牛(Y07721)、紫苏(AB362191)和玉米(EU964162)等植物的GST氨基酸序列的同源性系数分别为99％、67％、64％、61％
和47％。半定量PCR显示，在果实着色过程中， G 在果皮中表达随花色苷的合成上调；在茎、果肉和果皮中均有表
达，而在叶片中不表达，表明VAmGST4的表达与花色苷的生物合成密切相关。
关键词：山葡萄；cDNA克隆；谷胱甘肽 转移酶
cDNACloningandExpressionAnalysisofGlutathioneS-Transferase(VAmGST4)
inVitisamurensisRupr．
LIU Hai—Feng ，WANG Jun
CenteryorViticultureandEnology,ColLegeofFoodScienceandNutritionalEngineering,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing
100083，China,2AgriculturalCollegeofYanbianUniversiyt,Yanji,Jilin13300~China
Abstract：Thefu11一lengthcDNA sequencesOf mGST4genein tisamurensiswereclonedbythetechnique
ofI PCRandSMARTRACE．The1andingGenbankNo．iSFJ645770andthefu11一lengthof mGST4cDNA
iS885bDwithopenreadingflameof642bp whichencodes213aminoacids．TheproductOf mG fgene
expressioniSunstableproteinwiththemolecularmassof24．24kDa．isoelectricpointOf5．72．TheVAmGST4
genebelongstotheGSTsupergenefamily,notcontainingasignalpeptide．TheaminosequenceofGsTin F~tis
amurensishasthehomologywithGSTof fisvinireFa(AY971515)Litchichinensis(EF613493)，Petunia —
brida(Y077211，Pef，lafrutescens(AB362l91)andZeamays(EU964162)，andthehomologycoemcientiS
99％．67％．64％．61％ and47％ respectively．Semi—quantitativePCR analysisshowedthatVAmGST4genewas
expressedinthestem fleshandskinexceptinthelea~Particularly,duringcoloringprocess，theexpressionlev—
elof mGST4inskinincreasedprogressivelybytheaccumulationofanthocyanins．Theresultdemonstrated
thattheexpressionlevelOf mG hadclosecorrelationwiththeaccumulationofanthocyanins．
Keywords： fisamurensis；cDNAcloning；glutathione transferase
成熟葡萄的果皮中大多含有花色苷(anthocya— 可 以催化花色苷通过共价键与谷胱甘
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