高效毛细管电泳法对十大功劳属植物的研究.pdfVIP

3．4重现性试验：取一批样品称重6份，分别依样品溶液制备方法操作。测定结果为0．0535，0．0540， 0．0525，0．0535，0．05柏。0．0498％，RSD=3．04％。 3．5加样回收试验：称取巳知含量样品5份。分别加入3’一甲氧基黄素，依样品涪液恻备方法操作。平均 回收幸(96)为101．3；RSD(％)为2．40。 4讨论与鼙暴 4．1色谱条件的选择：有学者认为差一个甲氧基的黄酮极难分离。为了将3’一甲氧基蓟黄素与蓟黄素及 干扰成分分离，我们系统地筛选了甲醇一乙腈一水三元体系的不同比例，并考察了流动相酸碱性和柱置的影 响，确立文中使用的色谱条件。 4．2样品溶液的翻备：根据3’一甲氧基蓟黄素的溶解性质，选择比较了甲醇，丙酮，乙醇3种提取溶剂，并 考察了回流提取和超声处理时间，最终确立用甲醇回流提取30rain的提取条件。 为了排除其它成分对3’一甲氧基蓟黄素峰的干扰．采用聚酰胺柱进行样品溶液的净化。考察了洗脱溶 剂种类和体积，建立了样品净化的参数。 3’一甲氧基蓟黄素在茎中古量较低，因此在古量测定中采取了增加称样量并增加柱上样体积的措施。 4．3测定结果表明：3’一甲氯基蓟黄素在花蕾和茎中含量差异较大花蕾中古量比茎拔中古量商约6～12 倍，样品含量亦有一定差异，最大者约差3倍。(参考文献略) 高效毛细管电泳法对十大功劳属植物的研究 纪秀缸李家实 阉玉凝(北京中医药大学 100029) 区为主。车属植物绝大多数人药，有清热解毒、消炎止痛、燥湿泻火、清肝明目之功效，民间应用历史悠久。 该属植钫为多年生小整木，赍源丰富，产量大，很多品种还没有被研究和充分、合理地开发利用。十大功劳属 植物具有广泛的药理活性，对于本属植物的化学成分过去曾有报道，主要是生物碱类，具有抗菌、消炎、抗病 毒、抗癌、抗心事失常、降血脂、抗血小板聚集、平滑肌橙弛等作用，而且，M．aquiMiuraNutt．的提取物据报道 治疗牛皮癣疗效确切，因此受到国内外的广泛关注。 1 十大功劳■十种檀鞠生物碱的舍■测定 [Mahoniabealei(Fort．)Carr．]和细叶十大功劳[Mahonia 功劳木为上述两种植物的干燥茎。但同属多种植物的茎在民间也入药，代黄连用，称木黄连或刺黄连、山黄 连等。该属植钉主要含生物碱，2000版中国药典古量测定采用分光光度法测总碱的方法，对其含量测定还 有用TLC法和HPLC法的报道。HPCE法因其柱效高，样品预处理简单，分析速度快，样品用量少等优点， 近年来越来越多地被应用于中草药的分离鉴定方面。本实验采用HPCE法的CZE模式，用内标法．对lO种 十大功劳属植物中的小菜碱、巴马汀和药根碱的吉量进行了测定。为其质量控制建立了一种新的快速、简便 有效的检测方法。 1．1仪器、药品与试剂 ID× HI∞DCE高效毛细管电泳仪(美国惠普公司)，配有二极管阵列检测器。熔融石英毛细管50#m 375ttmOD(毛细管总长度为50em，有效长度为41．5cm)。 究员鉴定外，其余均由北京中医药大学阎玉凝教授鉴定。 盐酸小集碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱、马钱子碱等对照品均翦自中国药品生物制品检定所。磷酸氢二 钠、磷酸二氢钠、磷酸、氧氧化钠、甲醇、硼砂均为AR jE京化工厂生产。实验中配制缓冲液和样品溶液所用 的水均为超纯农。 1．2实验方法 5】8 甲醇(2：1 3min，缓冲液洗3min，平衡imin。 0．55ml，混匀．通过0．45tan滤膜过滤，滤液用超声波脱气后直接进样。 量瓶中。用甲醇溶解定容至刻度。将此溶液用甲醇稀释成一系列不同浓度的标准溶液，取各标准溶液5ral， 后面操作同样品溶液制备(n=5)。结果见表1。 of 2 DatamⅢld-rdcalJbrathm 5 Tabl c．urv8(n 1．2．4加样回收辜试验：精密称取不同量的3种标准品。分别加到已知含量的阀叶十大功劳样品细粉中，按 样品制备方法进行提取、测定，计算回收率。结果见表2。 Tab