丹参有效成分抑制HSC-T6细胞增殖的作用研究.pdfVIP

黄疽重则重用赤芍；有消化道出血者，为排除肠道积血和加速内毒素的排泄，可在短期内重用大黄， 不仅有助于预防内毒素血症，而且可以防治出血后并发腹膜炎所致的中毒性肠麻痹。结果表明采用 中西医结合措施防治慢性重症淤胆性肝炎所致内毒素血症，可使其存活率由原来的30％左右提高到 85％‘引。 此外，中药结肠灌洗能显著降低重型肝炎患者血清内毒素水平。复方大承气汤(大黄、芒硝、厚 朴、枳实、桃仁、炒莱菔子、赤芍)灌肠，具有通腑泻热、泄浊解毒之功能。可通过抗菌，减少肠道 氨及毒素产生，促进其排泄等发挥治疗作用n。 5展望 综上所述IETM参与重型肝炎各种并发症的发生和发展，严重影响其预后。预防和控制IETM的发 生是成功治疗重型肝炎的关键。目前对IETM的治疗研究己作了大量研究工作，取得了一定的进展， 但总体来说尚无十分理想的药物，也没有完全成熟的经验。今后应加强中西医结合防治肝病肠源性 内毒素血症的临床研究，以开发出能够阻断肝病肠源性内毒素血症的有效药物。尤其是探求肝病肠 源性内毒素血症的中医本质并运用相应有效方剂对其进行防治研究具有广阔的前景，必将成为慢性 肝病研究的热点和重点之一。 丹参有效成分抑制HSC-T6细胞增殖的作用研究 汪晓军1，马赞2，张奉学3，郭兴伯3 (1首都医科大学附属北京佑安医院，北京市丰台区右安fJ#b西头条8号；2首都医科大学中医药学 院，北京市丰台区右安门外西头条10号；3广州中医药大学热带医学研究所，广东，广州市机场路 12号) X 单细胞悬液稀释成浓度为2．0 箱内培养，24h后将不同稀释度的丹参注射液按0．1ml／孔加入培养孔。实验另设培养液空白对照组 和细胞对照组．每24h观察细胞形态及其生长状况，实验第4天取细胞上清液，所余细胞以MTT法 用酶标仪测定OD值，计算出药物对细胞增殖的抑制率。结果丹参注射液1／1，1／2，1／4，1／8，1／16 降低．结论丹参注射液有明显抑制HSC-T6细胞增殖的作用，且有明显的浓度依赖，在8倍稀释浓 度时的抑制率较高且细胞破坏较轻． [关键词]丹参肝星状细胞细胞增殖 1实验目的 通过研究活血化瘀药丹参的有效成分对HSC-T6细胞增殖的影响，观察活血化瘀中药对HSC增殖 443 的抑制作用，从而说明活血化瘀药物对肝纤维组织增生有较好的抑制作用。 2实验材料： 2．1实验细胞：HSC-T6细胞系，上海中医药大学肝病研究所所长徐列明教授惠赠。 2．2实验药物：丹参注射液为丹参经加工制成的约含生药19／ml的灭菌水溶液，江苏康怡制药有 限公司生产，批号：020610。 2．3药物处理 实验前配制备用原液：将药液先60C水浴2h以增加药效，然后置80℃水浴30分钟、连续3天 除菌处理，一20℃保存备用。临用时配成含2％血清的高糖DMEM培养液并倍比稀释为十种所需浓度。 2．4主要试剂 司；EDTA自上海生工生物工程公司Amresco进口分装；青霉素、链霉素购自华北制药有限公司。 2．5主要仪器 公司)；细胞计数板；微孔滤膜(O．45№、0．2舳)，上海半岛实业有限公司；Leica荧光生物显微镜； 二氧化碳培养箱；美国宝特ELx800型全自动酶标仪。 3研究方法 3．1细胞生长动态观察 取第3代单细胞悬液，常规细胞计数，以含5％胎牛血清的高糖DMEM培养液稀释成所需浓度。按 置培养箱培养，每24h观察细胞形态及其生长状况，以MTT法用酶标仪测定490nto波长处细胞光密 度值(OD值)并取均数，实验另设培养液空白对照组和细胞对照组各四孔。根据每天所测oD值均数 与对照组oD值的比值，绘制细胞生长曲线。 3．2细胞增殖活性的检测： 不同浓度及生长时间细胞0D值的测定按噻唑蓝比色法(MTT法)检测n1。 胞层，继则加入100％DMSO 分钟)呈蓝紫色，轻轻摇匀或在微型振荡器震荡5min后，用全自动酶标仪在490nm波长处作比色 444 法测定各孔0D值，空白对照孔中加入100％DMSO0．Iml／孔，测得的各复孔0D值取平均数。 3．3HSC-T6的细胞培养 3．3．1细胞复苏与冻存：采用常规方法操作。 3．3．2细胞培养与传代：高糖DMEM