幽门螺杆菌诱导人胃癌mkn45细胞cox2表达de信号转导研究.pdfVIP

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· 108- 肿瘤 2009年 2月第 29卷第2期 TumorVo1.29,No.2,February,2009 DOI:10.3781/j.issn.1000—7431.2009.02.002 BasicResea j“:基础研j究 幽门螺杆菌诱导人 胃癌 MKN45细胞 COX-2表达的信号转导研究 李 琦,范忠泽,孙 珏,刘宁宁,王 炎,周利红,吴 琼,隋 华,李先茜,高 虹 (上海中医药大学附属普陀医院肿瘤科,上海 200062) [摘要] 目的:探讨p38丝裂原活化蛋白激酶 (p38mitogen—activatedproteinkinase,p38MAPK)信号转导对幽门螺杆菌( 胁 cobacterpylori,Hp)感染的胃上皮细胞MKN45中环氧合酶 (cyclooxygenase一2,COX-2)表达的调控作用,揭示Hp感染引发 胃癌 的部分机制。方 法:采用实时荧光定量一PCR(real—timefluorogenticquantitative—PCR,RFQ—PCR)检测Hp标准株NCTC11637感 染对MKN45细胞中COX.2mRNA表达的影响,Western印迹法检测Hp感染MKN45细胞后p38MAPK信号通路的激活情况; 运用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路后,观察Hp对MKN45细胞 COX一2mRNA表达的影响。结 果 :Hp感染MKN45细胞后COX一2mRNA水平明显上调,Hp感染后3、6、9和 12h时COX一2mRNA的表达量分别为正常值的 3.0、7.2、5.1和4.3倍,各时间组COX一2mRNA表达均明显高于对照组(P0.01)。Hp作用MNK45细胞20min后p38MAPK 信号通路被激活,60min时达峰值;而采用 p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号转导通路后,Hp诱导的 COX-2mRNA表达明显降低 (P0.01)。结 论 :Hp感染能激活p38MAPK信号通路,通过p38MAPK信号转导上调COX-2的 表达,这可能是Hp感染}J发 胃癌的重要机制之一。 [关键词] 胃肿瘤;螺杆菌,幽门;环氧化酶2;信号转导 [中图分类号] R735.2;R730.231.3 [文献标志码] A [文章编号] 1000-7431(2009)02-0108-05 Studyon signaltransductionpathwayofHelicobacterpylori·inducedCOX-2expression inMKN45cells LIQi,FANZhong—ze,SUNJue,LIUNing—ning,WANGYan,ZHOULi—hong,WUQiong,SUIHua,LIXian—qian,GAOHong (DepartmentofOncology,PutuoHospitalAffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai200062, China) [ABSTRACT] 0bjective:Toinvestigatetheregulatoryeffectofp38mitogen—activatedproteinkinase(p38MAPK)onexpressionof cyclooxygenase一2(COX一2)inHelicobacterpylori(Hp)一infectedhumangastricepithelialMKN45cellsandrevealthemechanismunder— lyingtheinitiationofgastriccancerinducedbyHp.M ethods:TheexpressionofCOX一2mRNA wasdetectedbyreal—timefluorogenic quantitativepolymerasechainreaction (RFQ—PCR)inhumangastricepithelialMKN45cellsafterinfectionwithstandardHp NCTC11637.Theactivationofp38MAPK signalingpathwaywasassessedbyW esternblottingafterHpinfection.TheeffectofHponthe expressio

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