丙泊酚对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡及VEGF和ICAM-1表达的影响.pdfVIP

广东医学 2012年 lO月第 33卷第20期 GuangdongMedicalJourn~ Oct．2012，Vo1．33，No．20 ．3051． 丙泊酚对人肝癌细胞株 SMMC一7721细胞凋亡 及 VEGF和 ICAM一1表达的影响 张斌 ，黄翔，杨承祥，梁桦 ，周桥灵 广东省佛山市第一人民医院麻醉科 (528000) 【摘要】 目的 探讨丙泊酚对人肝癌细胞株SMMC一7721细胞凋亡及血管内皮生长因子(VEGF)和胞间黏 附分子 一1(ICAM一1)表达的影响。方法 将对数生长期的人肝癌细胞株SMMC一7721细胞接种于 12孔培养板 中，培养24h后，随机分为4组：对照组(c组)、脂肪乳组(E组)、不同丙泊酚组(P1组和P2组)，每组8孔。c组 不作任何处理，E组、Pl组和P2组分别给予脂肪乳剂 10 g／mL、丙泊酚 2．2 g／mL和丙泊酚 3．2 g／mL培养 6 h。分别于处理前，处理2、4和6h时，取SMMC一7721细胞 ，应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，计算细胞凋亡 率；应用蛋白质印迹法检测VEGF和 ICAM一1的蛋白表达水平的变化。结果 与处理前比较，E组处理2、4和6 h后，细胞凋亡率以及VEGF和 ICAM一1的蛋白表达水平变化差异无统计学意义(P0．05)，P1组和P2组处理 2、4和6h后，细胞凋亡率升高以及VEGF和 ICAM一1的蛋白表达下调 (P0．05)；与c组比较，E组处理2、4和6 h后，细胞凋亡率以及VEGF和 ICAM一1的蛋白表达水平变化差异无统计学意义 (P0．05)，P1组和P2组处理 2、4和6h后 ，细胞凋亡率升高以及 VEGF和 ICAM一1的蛋白表达下调 (P0．05)；与E组比较，P1组和P2组处 理2、4和6h后，细胞凋亡率升高以及VEGF和ICAM一1的蛋白表达下调(P0．05)；与P1组比较，P2组处理2、 4和6h后 ，细胞凋亡率升高以及VEGF和 ICAM一1的蛋白表达下调(P0．05)。P1、P2组组内丙泊酚不同作用 时间之间的比较，随作用时间的延长，细胞凋亡率升高，VEGF和 ICAM一1表达降低，差异有统计学意义 (P 0．05)。结论 丙泊酚可诱导人肝癌细胞株SMMC一7721细胞凋亡以及降低VEGF和 ICAM一1的表达，该效应可 能随丙泊酚浓度升高和作用时间的延长而增强。 【关键词】 丙泊酚；静脉麻醉药；细胞凋亡；抗原；血管内皮生长因子；胞间黏附分子一1 肝癌是世界上常见的消化系统恶性肿瘤 ，其治疗 VEGF、ICAM一1单克隆抗体 (CellSignalingTechnology 方法多以手术治疗为主。在肝癌的手术治疗和其他治 公司，美国)HRP标记的羊抗兔IgG二抗 (SouthernBio· 疗过程中常需要应用到多种麻醉药物 ，丙泊酚是治疗 technologyAssociates，Inc．SBA，美 国)。HRP标记 的 过程中常用的一种静脉麻醉药物。丙泊酚具有起效 GAPDH(上海康成生物)。发光液(货号：WBKLSO100， 快 、持续时间短、苏醒迅速而且平稳的特点，是 目前临 Millipore，美国)。 床上广泛应用的静脉麻醉药。研究表明，丙泊酚抑制 1．2 SMMC一7721细胞 的培养与处理 SMMC一7721 结肠癌细胞和乳腺癌细胞的生长和侵袭 。但是丙泊 细胞用含 10％胎牛血清的RPMI1640培养基于37qC、 酚对肝癌细胞的影响目前尚不明确。血管内皮生长因 5％CO 、饱和湿度培养箱中培养，每隔2～3d用含0．02％ 子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是一类促 乙二胺四乙酸的0．25％胰酶消化，以1：3传代 1次。将培 进肿瘤血管生长的因子 ，胞间黏附分子 一1(intercellu． 养的细胞接种于 12孔培养板，细胞接种密度8×10 · 1aradhesionmolecule一1，ICAM一1)是肿瘤细胞与细 mL～，置于37cC、5％CO培养箱中，继续培养24h。 胞外基质结合的重要黏附分子，它们在肿瘤的侵袭过 1．3 实验分组与处理 取对数生长期的人肝癌细胞 程中起着重要 的作用 。丙泊酚对人肝癌细胞株 株 SMMC一7721细胞，采用随机数字表法，将