家猪(Susscrofadorrzestica)体细胞染色体的研究1).pdfVIP

遗传 HEREDITAS 1(5) 6-19 1979 家猪 S（usscrofadorrzestica）体细胞 染色体的研究” 陈文元 王子淑2) （四 III大 学生物 系） 家猪体细胞染色体 2（n二38）已有报 染色前在56℃的。.025M磷酸缓冲液 (pH6.8) 道1-〔91。近年来应用染色体分带技术对家猪染色 中处理10分钟，然后用临时配制的胰酶Leish- 体作了进一步鉴定10〔-181。但由于方法不同和缺 man液 L（eishma。粉25毫克、甲醇15毫升、 乏统一标准，其结果不完全一致。对于我国家 0.025M磷酸缓冲液35毫升、0.25多胰酶0.18一 猪品种染色体的研究，目前尚少报道。我们以 0.22毫升）染色 10-20分钟 （150-300C）流水 四川的内江猪、荣昌猪、柳加猪和成华猪为对 冲洗数秒，空气干燥。 象，用外周血淋巴细胞培养方法制备染色体，用 三（）C-分带染色 Giemsa常规染色，G一分带和C一分带染色，对这 用Arrighi,Hsu的方法，，〔，，，，‘稍加改进。选 些家猪的染色体组型，G一分带和 C一分带作了 择片龄在一月内，染色体较长，单体分开的标 详细的分析。 本，用 2XSSC,NaOH液 S（SC由0.15M氯化 钠,0.015M柠檬酸钠组成。再用浓NaOH调整 一、材料和方法 到pH12.2)碱处理18-25秒。经6XSSC,75% 乙醇、95%乙醇漂洗、空气干燥。加 1-2滴 本实验用的供试材料有3-6月龄的内江 6XSSC于玻片标本上，加盖片，然后架于盛有 猪、荣昌猪、柳加猪和成华猪各5头，用兰德拉 少许6XSSC的培养皿中 （湿室法），置于6000 斯猪2头作对照。 温箱保温一天。再经6XSSC,75%乙醇，95% （一）淋巴细胞培养 乙醇漂洗，空气千燥。 用下液染色40分钟： 采用半微量全血培养法[19,201，略加改进。培 pH6.8-7.2缓冲液1.5毫升 (0（.1M柠檬酸用 养基组成： EaglesMEM 4毫升，猪血清 1毫 0.2M磷酸氢二钠调整到pH6.8-7.2）甲醇1.5 升，pHA(1:410)0.04毫升，接种全血0.5毫升。 毫升，Giemsa原液5毫升，蒸馏水50毫升。流 在38.2℃温箱中培养 ％小时。 培养终止前6 水冲洗数秒，空气干燥。 小时加人秋水仙素，使其在培养物中的最终浓 度为0.01-0.015微克／毫升。制片时先离心去 二、 结 果 掉上清液，细胞在0.4多氯化钾溶液 （380C）中 低渗10分钟，用甲醇、冰酷酸固定、文火烘干。 一（｝染色体组型分析 二（）G一分带染色 采用Sun,Chu,Chang的方法t221稍加改 1)本实验得到四川省农业科学院荣昌种猪试验站大力支 变。选择片龄在一月内，染色体氏而紧密的标 持，四川医学院肿瘤研究室张思仲同志提供修改意见， 表示感谢。谨此致谢。 本。将它置于60℃温箱中保温一天或更久。临 2)本组石安静同志参加了部份工作。 6 表1 家猪体细胞染色体相对长度和标准误 染色体编号 内 江 猪 荣 昌 猪 柳 加 猪 成 华 猪 1 11.24土0.143