小鼠死后滞留对卵母细胞和胚胎的影响.pdfVIP

山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 各种实验中所使用的卵母细胞多数来自屠宰场宰杀后的动物。死后动 物机体会发生一系列生理生化变化，这些变化对卵母细胞质量的影响有待 研究。本实验研究了处死小鼠后短时间滞留对卵巢卵母细胞、排卵后卵母 细胞和着床前胚胎的影响，为更好地利用卵母细胞和胚胎，以及为合理地 进行组织保存提供科学依据。实验结果如下；1．随滞留时间延长排卵后卵 母细胞死亡率和自发激活率升高，同样滞留时间，随卵龄增加排卵后卵母 细胞死亡率和自发激活率升高。2．输卵管在M2中放置、腹腔全开口体内 滞留以及腹腔半开口体内滞留三组相比，只有半开口体内滞留长达15min 时死亡率(27．8％)较高，其余处理死亡率较低且差异均不显著；自发激活 率三组依次升高，其中输卵管在M2中放置不引起卵母细胞死亡和自发激 活。3．不同品系小鼠卵母细胞对输卵管在体内滞留产生的反应不同，滞留 10min C57BL／6系小鼠卵母细胞死亡率为56．5％，显著高于昆明鼠(47．6％)； 自发激活率分别为13．3％和46．o％，C57BL／6系小鼠显著低于昆明鼠。4．hCG 后24h体内滞留5min卵母细胞在CZB中培养自发激活率为81．1％，显著 低于SrCl。孤雌激活率(96．4％)；自发激活的卵母细胞有较高的卵裂率 卵母细胞经SrCl。孤雌激活囊胚发育率为22．9％，差异不显著。HCG后18h 卵母细胞经SrCl：孤雌激活卵母细胞囊胚发育率为64．6％，显著高于24h 卵龄卵母细胞自发激活和诱导孤雌激活囊胚发育率。5．滞留20min不引 起原核胚、2-cell胚胎和桑椹胚以及囊胚的死亡。滞留lOmin获取的原 核胚体外培养囊胚率为81．2％显著低于对照组(93．2％)，随滞留时间延长， 滞留20min囊胚率为67．5％，显著下降。6．滞留30rain从卵巢获取的卵丘 卵母细胞复合体体外成熟率为97．2％，与对照组(98．5％)差异不显著， 孤雌激活后囊胚发育率分别为15．7％和16．7％，差异也不显著。结论：1． 短时间滞留不会导致卵巢卵母细胞功能退化，但却能严重影响排卵后卵母 细胞，导致其死亡和自发激活，且随着排卵后卵母细胞在体内的老化这釉 影响更明显。2．短时间滞留不会引起着床前胚胎死亡，但却使原核胚发育 到囊胚能力显著下降。3．输卵管在死后小鼠体内滞留，对不同品系小鼠卵 母细胞影响存在差异。4．腹腔开口会降低滞留对排卵后卵母细胞的影响。 5．hCG后24h的卵母细胞虽然经短时间滞留自发激活后能发育到囊胚，但 卵母细胞老化导致其囊胚率较低。 关键词：小鼠卵母细胞胚胎死亡自发激活 小鼠死后滞留对卵母细胞和胚胎的影响 Abstract in killed inallkindsof werefromanimals Most used oocytes experiments and willtake biochemical abattoirs．The changes,the body placephysiological the on isinneedof studiedtheeffectof oocytes impact quality study．we after oftim