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中山大学化学学院 邹世春 色谱分类方法： 1. 按固定相外形分： 柱色谱（填充柱、空心柱）、平板色谱。 2. 按组份在固定相上的分离机理： 吸附色谱：不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组份在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱（尺寸排阻色谱）不同尺寸分子在固定相上的渗透作用。 3. 按色谱动力学过程分类 a 淋洗色谱法： 以与固定相作用弱的组分为流动相，组分按照与固定相作用力、吸附力或溶解力的差异，由弱到强先后洗出。这种方法是最为广泛的色谱方法。 b 置换色谱法： 是指样品输入色谱柱后, 用一种与 固定相作用力极强的置换剂通入色 谱柱, 去替代结合在固定相表面的 溶质分子。置换色谱有明显的优点, 即上样量大、产率高、而且易于操作。 c 迎头色谱法： 以试样混合物为流动相，与固定相作 用力弱的组分最先以纯物质状态流出， 此方法适用于少数几个组分混合物的 分离，纯化。处理样品量大如活性炭 过滤、制备去离子水等。 色谱法的特点： 首先是一种分离分析方法，定量分析准确； 与精馏，萃取相比，具有速度快，效率高，选择性好的特点，但样品处理量少； 可用于分离沸点相近，物理化学性质相似的同系物、同分异构体、对映异构体等； 可以解决化学分析不能用于复杂组成样品的分析； 将色谱仪和光谱仪、质谱仪联用，可以解决更多的分析任务，是当今仪器分析发展的方向。 保留指数 1.同一组分的保留时间随色谱条件的变化而变化； 2.相对保留值随标准物不同而变化； 3.用保留指数定性具有普遍意义： 定义：以正构烷烃H(CH2)nH作为测定相对保留值的统一标准，并定义正构烷烃 的保留指数为100n，欲测定某化合物(X)的保留指数以适当碳数正构烷烃的保留值表示。 X为未知物，n为正构烷烃的碳原子数。 实际应用中通常以100X作为该物质的保留指数，以IR表示(Kovats指数) 保留指数实际上是以正构烷烃系列或相应衍生物作为度量各种溶质相对保留值的标尺，对研究分子结构欲保留行为关系、保留机理具有理论和应用价值。 塔板理论假定： 1）塔板之间不连续，高度均等，以塔板高度H表示； 2）组分在各塔板内两相间的分配瞬间达至平衡，达一次平衡所需柱长为理论塔板高度H； 3）某组分在所有塔板上的分配系数K同； 4）流动相以不连续方式加入，即以一个个的塔板体积加入， 5）塔板之间无分子扩散。 组分在塔板中的分配，分配比为1 色谱流出曲线方程 1.对于一般气相色谱或高效液相色谱其塔板数N介于1000-1000000之间，组分经色谱柱流出曲线趋近于正态分布。 2.色谱流出曲线方程： 如果将洗出浓度与体积的关系改为与时间t的关系： 3.组分色谱峰最高浓度： 式中cmax与进样量和理论塔板数的平方成正比，与溶质的保留体积成反比。也就是说，N越高，色谱峰越窄；保留值越高，色谱峰越宽。 完全速率理论方程： 6）色谱柱温度 温度将影响溶质在固定相和流动相中的扩散系数，使扩散系数变大。分子扩散将导致柱效降低；改善传质将导致柱效升高。温度变化对柱效的影响是矛盾的。应判断引起色谱峰扩张的主要因素，选择合适的温度。 7）柱外谱带展宽效应 包括进样器、连接管路、检测器的形状与体积将导致分子扩散效应增加。应选择内径细而短的连接管路。 温度对分离的影响： 有关速率理论的说明： 由以上讨论可知： (1) 组分分子在柱内运行的多路径、涡流扩散、浓度梯度所造成的分子 扩散以及传质阻力使气液两相间分配不能瞬间达至平衡等等因素，是造成色谱峰扩展、柱效下降的主要原因； (2) 通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效-----即色谱分离条件优化过程； (3) 速率理论为色谱分离和操作条件选择提供了理论指导。阐明了流速和柱温对柱效及分离的影响； (4) 各种因素相互制约，如载气流速增大，分子扩散项的影响减小，使柱效提高，但同时传质阻力项的影响增大，又使柱效下降；柱温升高，有利于传质，但又加剧了分子扩散的影响，选择最佳条件，才能使柱效达到最高。 6.4 分离度及色谱分离方程 一、分离度(Resolution, R) 同时反映色谱柱效能和选择性的一个综合指标。也称总分离效能指标或分辨率。其定义为： 利用此式，可直接从色谱流出曲线上求出分离度R。 R 越大，相邻组分分离越好。当R=1.5时，分离程度可达99.7%，因此R=1.5通