高产5_氨基乙酰丙酸光合细菌株hemA基因的克隆与序列分析.pdfVIP

高产5_氨基乙酰丙酸光合细菌株hemA基因的克隆与序列分析.pdf

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( ) 第 28卷 第 5期 暨南大学学报 自然科学版 V o l. 28 N o. 5 2007年 10月 J ou rna l of J inan U n iversity (N atu ra l S c ience) O c t.  2007   高产 5 - 氨基乙酰丙酸光合细菌株 h e mA 基因的克隆与序列分析 1 1 2 1 1 1 孙  勇 ,  吴  任 ,  章  力 ,  李慕婵 ,  雷腊梅 ,  谢数涛 ( 1. 暨南大学生命科学与技术学院 ,水生生物研究所 , 广东 广州 510632; 2. 中山大学生命科学学院 , 广东 广州 510275) ( ) [摘  要 ]  对从不同生态环境中分离得到的 20株光合细菌 ,进行 5 - 氨基乙酰丙酸 5 - ALA 的产量检测 ,结果显 示一株分离自广州市云溪公园池塘底泥的菌株 R5,其 5 - ALA 产量最高 ,达 4 92 m g/L. 根据 GenB ank上公布的 5 - 氨基乙酰丙酸合成酶 hemA 基因序列 ,设计引物进行 hemA 基因的克隆. 结果表明 ,菌株 R5 的 hemA 基因序列长 1 230 bp , 不含 H indⅢ酶切位点 , G + C为 64 68% ,编码一个 409个氨基酸的酶蛋白,分子质量为 44 9 ku ,与 R ho dopseudom onas p a lus tris KU GB306菌株的 hemA 基因序列相似性为 986% ,氨基酸序列相似性为 100%. 系统发生树 显示 ,菌株 R5与 R hodopseudom onas p a lus tris处在一个分支 ,显示菌株 R5可能是 R hodopseudom onas p a lustris, 这与微 生物鉴定实验的结果一致. 本研究克隆的高产 5 - 氨基乙酰丙酸菌株的 hemA 基因 ,为后期获取高产 5 - ALA 的基 因工程菌打下基础. [关键词 ]  5 - 氨基乙酰丙酸 ;  光合细菌 ;  沼泽红假单胞菌 ;  hemA [中图分类号 ]  Q3 1  [文献标识码 ]  A   [文章编号 ]  1000 - 9965 (2007) 05 - 0518 - 06 C lon ing and sequence ana ly sis of h emA from a stra in of photosyn thetic bacter ia w ith h ighy ield production of 5am inolevulin ic ac id 1

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