阳离子脂质体作为基因载体的初步研究.pdfVIP

中文摘要 为了能制备出转染效率高、细胞毒性小的基因载体，本文对非磁性及磁性阳 离子脂质体作为基因载体进行了初步研究。 阳离子脂质体的转染效率和细胞毒性主要取决于阳离子脂质体中阳离子脂 质分子。本文以BOP为偶联剂，通过柱层析分离提纯，成功合成了三种阳离子 脂质分子胆酸懒氨酸一代偶联物(CA-Lys)、胆酸／赖氨酸一代偶联物(CA．Lys。 结构与所设计的目标分子的结构是一致的。 在此基础上，以上述三种阳离子脂质为原料，制备了一系列的阳离子脂质体 和磁性阳离子脂质体，并且对其形貌、粒径、Zeta电位、与DNA的相互作用以 及细胞毒性进行了测试。TEM和粒径分析表明，三种阳离子脂质体和磁性阳离 子脂质体的形貌都呈球形，平均粒径在110．140rim之间。Zeta电位测试表明， 小的阳离子脂质分子。 阳离子脂质体的毒性主要来自于小分子阳离子脂质分子。为了减小毒性， 本文还采用了生物相容性好的阳离子大分子壳聚糖(cS)及其衍生物氧羧甲基 对脂质体和磁性脂质体进行表面改性，从而得到阳离子脂质体和磁性阳离子脂质 所增加，表面电性由负电变为正电。凝胶电泳分析表明，CS、OCM．CS和16．CS 表面改性的脂质体与DNA质量比为10：1时能形成稳定的复合物，Lys．CS表面 改性的脂质体与DNA质量比为2：1时能形成稳定的复合物。MTT实验表明，CS、 OCM．CS、16-CS和Lys．CS的加入可以降低脂质体的细胞毒性。 综上所述，在本研究所制备的非磁性和磁性阳离子脂质体中，有可能筛选出 转染效率高、细胞毒性低的基因载体。 关键词： 胆酸赖氨酸壳聚糖阳离子脂质体磁性阳离子脂质体基因载体 ABSTRACT to carrierwith low Inorder transfection and pl℃parcgene high efficiency and cationic carrierhadbeen cytotoxicity,Non-magneticmagnetic liposome船gene inthisdissertation． preliminarilyinvestigated of on Transfectionand cationic efficiencycytotoxicity liposomemainlydepend cafiomc and been cationic had lipid．Three lipidsCA-Lys,CA-Lys-Lys2OA-Lys with andcolumn successfullysynthesizedBOP勰couplingreagent chromatographer that to and showedmolecularStnletureof MS products．1HNMRanalysis purify Wereconsistentwiththat molccules．． products oftarget Aseriesofcatiomc and catiomc hadbeen