双酚A对中国林蛙（Rana+chensinensis）毒性和性腺分化雌激素效应.pdf

双酚A对中国林蛙(Ranachensinensis)的毒性和性腺分化的雌激素效应 炅_|l竟E 摘要 随着工业的快速发展，酚类对环境污染的R益加重，双酚A(BPA) 是一种化工原料的降解产物，对动物尘存环境已形成污染。在高浓度下具有毒性 效应，可直接导致动物中毒死亡；在低浓度对动物的内分泌机能具有干扰作用， 导致动物生长发育和生殖机能异常，从而影响种群的正常繁衍。本研究以中国林 蛙(Rana 性腺分化的雌激素效应，探讨酚类环境雌激素的效应机制，并为环境保护提供理 论依据。 实验将蝌蚪分为成体染毒组和野生组，分别暴露不同BPA浓度的水体中．变 态完成后统计成活率、体长和体重、变态时间和雌雄比例。评价BPA对蝌蚪生长 发育的毒性效应和对性腺分化的雌激索效应。用免疫组化方法检测ER、AR和芳 香化酶在性腺中的表达及ER在肝中的表达。主要结果如下： l jM、2．993 BPA对中国林蛙蝌蚪24h、48h、72h的LD。分别为3．17×10 X 10。’M、2．854×10。1M，SD为0．8009x 101M。可见BPA在安全浓度以上，随着浓 度的增加，蝌蚪的死亡率也增加。 没有影响。在成体染毒组，BPA在101M下导致幼蛙体长减小。在野生组，各个 BP处理浓度对幼蛙体长没有影响。说明成体林蛀被BPA侵染后，其后代幼蛙 的体长可受某一浓度BP^的影响而减小。 BPA在1011M下，可导致成体染毒组和野生组蝌蚪变念后幼蛙的体重部明显 减小。而在其它BPA处理浓度下．对成体染毒组和野生组幼蛙的体重部没有明 显影响，说明BPA导致幼蛙体重减小仅在某一浓度范围。 3 fllJ明显延长。BPA对成体染毒组和野生组蝌蚪的抗变态作用无显著差异，说明BPA 对蝌蚪的抗变念作用与其父母代是否被BPA侵染无关。 4 BPA在lO’、lO’～下，可诱导成体染毒组幼蛀雌性比例明显增加，在10’M 下，BPA可诱导野生组幼蛀雌性比例明显增加。说明BPA诱导中国林蛙幼蛙雌性 比例升高仅在某一浓度范围。高于或低干这一．浓度范围部不能引起雌性比例明显 升高。成体染毒组受BPA诱导而雌性比例升高所适应的浓度范围比野生组大。 5 呈现一定规律。雌雄同体均出现于成体染毒组，在野尘组未出现。可见成体染毒 与雌雄同体的形成关系密切。推测林蛙成体受BPA侵染后．BPA进入母体卵巢 并蓄积于卯母细胞中，含商BPA的卵子受精后发育成蝌蚪，随后在性腺分化中 产生效应。 6通过免疫组织化学检测．10’M BPA对林蛀幼蛙精巢芳香化酶具有最大的 增强效应，这与BPA在10“M时导致雌性比例最大的实验结果～致。说明在蝌蚪 性腺分化过程中，芳香化酶活性的增强是诱导性腺分化为卵巢的重要因素。 7 BPA诱导ER表达的强弱与诱导芳香化酶表达基本～致。可见随着精巢内 芳香化酶含量的增加，ER含量在增加。其原因是BPA诱导芳香化酶表达后，芳 香化酶促使雄激素转化为雌激素，丽雌激素可上调ER的表达。因此，BPA在【01~f 时同样使ER最大程度表达。这与BPA在该浓度时导致雌性比例最大及最大程度 地诱导芳香化酶表达的结果一致。 8在成体染毒组和野生组，BPA都明显抑制幼蛀精关内AR的表达。并且在 较高浓度下，对成体染毒组AR表达的抑制作用强于野生组，而在较低浓度下， 对成体染毒组AR表达的抑制作用弱于野生组， 综上所述，8PA可诱导林蛙性腺转化为卵巢。不是作为外源雌激素直接作用 于性腺，而是由于BPA增强芳香化酶的表达，芳香化酶促使雄激素转化为雌激素， 改变雌雄激素的相对含量，而雌激素可诱导ER表达的增强，抑制AR的表达。 关键词：双酚A，中国林蛙，毒性效应，性腺分化，雌激素效应 bi Acute of sphenolAto its toxicity tadpole(Ranachenslnensis)and