2细胞生物学的研究方法.ppt

第二章 细胞生物学研究方法 细胞形态结构的观察方法 细胞组分的分析方法 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 用于细胞生物学研究的模式生物 第一节 细胞形态结构的观察方法 一、光学显微镜技术 相差显微镜 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。 这种显微镜最大的特点是可以观察未经染色的标本和活细胞。 荧光共振能量转移技术 当供体发射的荧光与受体发色团分子的吸收光谱重叠，并且两个探针的距离在10nm范围以内时，发生一种非放射性的能量转移。 青色荧光蛋白（cyan fluorescent protein, CFP）和黄色荧光蛋白（yellow fluorescent protein, YFP）是目前研究蛋白与蛋白相互作用的应用最广泛的FRET对。 荧光漂白恢复技术 首先用荧光物质标记膜蛋白或膜脂, 然后用激光束照射细胞表面某一区域,使被照射区域的荧光淬灭变暗形成一个漂白斑。由于膜的流动性,漂白斑周围的荧光物质随着膜蛋白或膜脂的流动逐渐将漂白斑覆盖，使淬灭区域的亮度逐渐增加, 最后恢复到与周围的荧光光强度相等。 可以获得扩散常数、蛋白移动率等。 二、 电子显微镜技术 电子显微镜的基本知识 主要电镜制样技术 扫描隧道显微镜 电镜与光镜的比较 主要电镜制样技术 ?超薄切片技术 ?负染色技术（Negative sta