增龄对大鼠成骨细胞RANKL、OPG+mRNA表达的影响及健骨颗粒干预作用.pdfVIP

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2017-09-03 发布于安徽
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增龄对大鼠成骨细胞RANKL、OPG+mRNA表达的影响及健骨颗粒干预作用.pdf

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● ● 一 ● L【r h - ‘，■ 、1■ ． -，增龄对大鼠成骨细胞RANKL、OPGmRNA表达的影响及健骨颗粒干预作用研究生：丁怀利导师：林燕萍教授中文摘要目的：从中医“肾主骨”理论入手，观察随着年龄增长成骨细胞RANKL、OPGmRNA表达的变化趋势，及健骨颗粒对成骨细胞RANKL、OPGmRNA表达的影响，探讨增龄在骨质疏松发病中的作用，以及健骨颗粒有效防治骨质疏松症的作用机理。方法： 1、体外培养不同年龄大鼠成骨细胞：原代细胞用酶消化法分别从出生24小时、 3月龄、6月龄、12月龄四个年龄组雌、雄SD大鼠颅盖骨取得，碱性磷酸酶染色鉴定系成骨细胞后，取第三代细胞进行实验。 2、制备健骨颗粒含药血清：3月龄清洁级雄性SD大鼠20只，随机分为2组，每组10只，分别为健骨颗粒含药血清组和生理盐水血清组，前者给予健骨颗粒颗粒含药血清和生理盐水血清。 3、检测指标：MTT法检测不同浓度健骨颗粒含药血清对成骨细胞增殖的影响，得出促成骨细胞增殖的最佳健骨颗粒含药血清浓度；分别以最佳浓度的含药血清和生理盐水血清作用于四个年龄组的成骨细胞48dx时，提取细胞总RNA，逆转录得到cDNA，以cDNA为模板荧光定量PCR．SYBR mRNA的表达。结果： 1、大鼠成骨细胞生长状况良好，改良Kaplow氏法碱性磷酸酶染色显示培养体系成骨细胞，纯度达90％以上。 2、MTT法检测显示健骨颗粒含药血清浓度为20％时干预体外培养的成骨细胞增殖最快，与同浓度生理盐水血清组相比有统计学差异(PO．05)。 3、成骨细胞RANKLmRNA的表达量随年龄增长而增加，而OPGmRNA的表达则正好相反。 4、健骨颗粒含药血清干预后各年龄组RANKL mRNA表达量均较生理盐水血清组减少、同时OPGmRNA表达量增加。健骨颗粒 A的表达 A表达随达升高。骨质疏松主题词：骨质疏松／中药疗法成骨细胞／药物作用细胞增殖基因表达@健骨颗粒 2 Genetic of in TheEffectof on RANKL／OPG Aging Expression Interventionof Granula Rat’SOsteoblastsandthe Jiangu