Mn^2+对apo-CP43结构影响的光谱学研究.pdfVIP

生物物理学报 2014年6月 第3O卷 第4期：274-284 www．ejb．org．ca ACTA B10PHYSlCA SINlCA Vo1．30 No．4 Jun．2014：274-284 Mn对apo．CP43结构影响的光谱学研究 王 豪， 肖清洁， 杨 蛟， 杜林方 四川大学生命科学学院，生物资源与生物环境教育部重点实验室，成都 610064 收稿 日期：2014．03．28：接受 日期：2014．06．16 基金项 目： 9‘73”计划项 ~I(2009CB118502)，国家自然科学基金项H 通讯作者：杜林方 ，电话：(028E—mail：dulinfang@SCU．edu．crl 摘要：CP43是PSⅡ中的内周天线色素结合蛋 白，对PSⅡ的组装 、结构稳定、能量传递 、电荷 分离、光合放氧等功能均起到重要的作用。作者应用 内源荧光光谱、同步荧光光谱、傅立叶变 换红外光谱 (Fouriertransform infrared，FTIR)和圆二色谱 (circulardichroism，CD)方法检测 了Mn2+对纯化的apo．CP43结构的影响。荧光发射和同步荧光光谱表 明Mn2+诱导apo．CP43中色 氨酸和酪氨酸残基周 围疏水性增加 。极性 降低 。Mn2+主要通过静态过程淬灭apo．CP43的荧光 ， 并与apo．CP43形成一个复合体。FTIR和CD光谱显示Mn2~诱导apo．CP43中无规卷曲的含量下 降、仅．螺旋 的含量增加 ，表明无规卷 曲结构 向 ．螺旋转变 ，Mn2+与apo．CP43结合形成 了一个 更为紧密的结构。 关键词：apo．CP43；Mn2+；蛋 白质结构；荧光光谱；圆二色谱；傅里叶变换红外光谱 中图分类号：O518 DoI：】0．3724／SP-J．1260．2014．40037 引 言 绿色高等植物、藻类以及蓝藻都通过 自身的光系统PSI和PSⅡ来吸收光能，提供还原 当量和化学能，并将二氧化碳转化成碳水化合物和其它有机分子及氧气 ”【。CP43由psbC基 因编码，包含六个跨膜螺旋 (I～Ⅵ)和五个亲水环，其中，V和Ⅵ两个跨膜螺旋之间的类 囊体膜内的亲水环 E环为最大环圆，免疫印迹测得apo．CP43的表观分子量为 52kD；它能 与 13个叶绿素 口、3～4个 B．胡萝 卜素分子结合，吸收并传递光能，调节、维持PSⅡ放氧 复合体和光反应中心的正常作用。CP43的E环由两个长的和三个短的 螺旋组成，其中一 个模体里的310-helix有一段保守序列GGETMRFWD (氨基酸残基 352~360)，X射线晶体结 构显示这段保守序列参与构成水裂解催化中心：第354位的Glu残基为锰簇中的一个锰原 子提供配位体，第357位的Arg残基作为一个重要的侧链，可促进水氧化过程中底物水分 子的去质子化3[1。最近，1．9A分辨率 PsⅡ的x射线晶体衍射结构研究结果进一步显示： CP43．Glu354与放氧复合体中M~CaO 的Mn2和Mn3配位，CP43一Arg357以氢键形式连接 在 Mn4CaO 中的02和 04上，CP43．Ala411参与构成氢键网络4】【。以此为基础研究Mrl2+对 apo．CP43结构的影响，对于探讨 CP43与锰簇的相互作用及其在光合作用中的功能提供了 一 些有价值的参考信息。在蓝藻中分离到游离的CP43与CP47，表明色素与蛋 白结合后， 274 王豪等：Mn 对 apo．CP43结构影响的光谱学研究 CP43再与PSⅡ反应中心组装[5]，虽然色素与蛋白结合部位 已经清楚，但能量如何在CP43 内部传递，哪一个叶绿素 口分子能量最低、最先接受传递来的能量，以及apo．CP43体