气相色谱和色-质谱法测定昆虫性信息素双键位置的研究.pdfVIP

[2]渡边忠一，分析机器 （日文），15(5)，15(1977). [3]P.L.Patterson ＆R.L.Howe,J.Chromatogr.Sci.,16,275(1978)． [4]P.L.Patterson,J.Chromatogr.,167,381(1978). [5]P.L.Patterson,R.A.Gatten＆ C.Ontiveros,J.Chromatogr,Sci.,20(3),97(1982)． [6]张乐沣、王雪涛等，科学通报，22,1373(1982). [7]B.Kolb＆ J.Bischoff,J.Chromatogr.Sci.,12,625(1974). （收稿日期：1985年6月13日） 气相色谱和色－质谱法测定昆虫性 信息素双键位置的研究 郭广忠 刘汉泉 吴元伟 （中国科学院上海有机化学研究所） 昆虫性信息素是一种微量生物活性物质，通常每头雌蛾中的含量仅毫微克，它们的 结构大部分是直碳链不饱和的醛、醇及其酯。因此测定昆虫性信息素的双键位置是通过 简易的操作在双键上进行化学反应，然后用高灵敏度的GC和 GC/MS 进行检测。本 文主要介绍用臭氧化[1]或将双键转化为环氧[2]，甲氧基鵞[3]等微量测定昆虫性信息素双键 位置的方法： 实 验 部 分 一（）设备材料： GC北分厂组装Varian3700毛细管色谱仪 弹性柱 FFAP2（5米×0.2毫米）SE-30 （1.0米 0.2毫米） GC-MSFinnigan40213%OV-1玻璃填充柱 2（米 2毫米） 样品：Δ3，4,5，Δ6，Δ7，Δ8，Δ9－C12：OAC*；Δ3，Δ4，Δ5，Δ6，?Δ7，Δ8Δ9－C12：OH Δ?7，Δ9，Δ11－C16HO，7,11－C16：OH，7,11－C16：OAC，3,13－C18：OH， 3,13－C18：OAC 及商品间氯过氧苯甲酸，醋酸汞和钠硼氢等。 臭氧发生器：高频电火花发生器自己改装。 二（）方 法： 1．臭氧化法：将200ng样品用0.5毫升乙醚稀释后，放入尖底反应管 （φ×65毫 米）中，通入臭氧，待指示剂 5（％硫酸淀粉和5％碘化钾混合溶液）变色后，浓缩至20 微升待测4〔〕。由于生成的过氧化物不稳定，在汽化室高温下分解为醛，酮，所以利用G 检测碎片的保留时间判断双键位置。为了便于判断，我们将一系列标准样品臭氧化碎片 与保留时间关系作图 如（图1）。如待测样品是 7-C12：OAC，取3微升浓缩样品进行 GC检测，得到保留时间为0.94与12.6的二个峰，从图1中可查到双键位置在第7位。 *C 2：OAC表示双键在C3的十二碳醇醋酸酯，其它类同 色谱条件选用极性柱，程序升温较好。如图27.11-C16:OAC的臭氧化产物是 CH3(CH2)3CHO,OHC(CH2)2CHO,OH (CH2)5CH2OAC。在极性柱上三个碎片峰 分离得很好，在非极性柱上由于前二个峰碎片峰的分子量相同就难于辨认了。 采用GC/MS检测，可提高灵敏度和可靠性，例如我们鉴定的枣粘虫性信息素的主要 成分，通过化学源单离子检测，只需200pg的样品，检测出二个组份的双键位置分别在 7位和9位[5]图（3）。 臭氧化只能在干冰浴中进行，因此要求稀释剂在低温下不凝固。若用GC检测，最好 选用响应值小的如CS2为稀释剂，以免影响保留值小的碎片检测。 2．环氧法：200ng待测样品用1毫升二氯甲烷稀释，加1毫克间氯过氧苯甲酸， 置于5毫升三角烧瓶中，室温下电磁搅拌1小时后，将澄清液吸入尖底小试管，用氮气 流浓缩至10微升取3微升用无分流进样做GC/MS。经GC/MS中离子源作用断裂的特征 峰在环氧二边，可根据碎片的质量数判断双键位置。图4就是按上述方法鉴定的二个双 键化合物的质谱图。 3．甲氧基法 ：将400ng待测样品，用2毫升甲醇稀释后，加入1毫克醋酸汞，置 于5毫升磨口三角瓶中，避光搅拌12小时，然后置于冰盐水浴中，边搅拌边缓缓加入 0.7毫克NaBH4至无明显发热为止。再加