基于金纳米颗粒使用电化学催化原理快速识别和定性检测瘤细胞.docVIP

基于金纳米颗粒使用电化学催化原理快速识别和定性检测瘤细胞 Alfredo de la Escosura-Muniz Christian Sa nchez-Espinel Bele n D?az-Freitas Africa Gonzalez-Fernandez Marisa Maltez-da Costa and Arben Merkoci 纳米生物电化学催化组纳米科学协会CIN2 (ICN-CSIC) 这是一个高要求简单，快速，高效， 为细胞检测用户友好的替代方法 一般来说，特别是为癌症细胞的检测。一个细胞的生物传感器能检测将是装置等应用。纳米粒子成功融入细胞的检测实验可能允许这种新型的细胞级开发传感器。事实上，它们的应用在未来的诊断及其他领域。作为一种新型生物传感器的例子，我们在这里报告一个电装置的肿瘤细胞特异性鉴定该量（AuNPs）金粒子平台传感器。肿瘤细胞增殖粘附的实现，探测器，其中包括一个大规模生产的碳电极（SPCE）。在现场鉴定肿瘤细胞的定量检测与实现限每700 4000个细胞。这细胞感应装置和选择性是基于细胞表面蛋白的特异性抗体结与。最后的检测只需要分钟，利用催化性能优势的演变。的检测方法不需要化学剂AuNPs的使用对现有的金球检测实验它允许该系统比其他昂贵和复杂的使用方法肿瘤细胞的检测小型化和便宜得多。我们设想，这个装置能运作，作为免疫或DNA的简单方法传感器。此外，它可以被使用，蛋白质分子或DNA检测股甚至缺乏经验工作人员生物传感器的开发和应用是一个行业领先的国家的最先进的纳米科学和纳米技术生物传感器是根据商业发展的许多需要进行检测新的敏感方法。目前很多对肿瘤细胞的常规检测方法（例如，免疫组织化学）价格昂贵或要求先进的检测仪器（如流）。因此，成本效益的方法，采用简单方便用户仪器，并能提供足够的敏感性和准确性会为护理诊断的理想选择。因此，在近年来，一些企图利用细胞分析光为基础的除了光学生物传感器敏感的电化学DNA传感器免疫传感器和其他最近都制定了本组和其他人生测，用标签和提供纳米颗粒直接探测化学在此，我们提出的设计和应用的一个新类亲生物传感器。基于一种新的平台，这是一个新细胞的DNA传感器和免疫传感器的启发。这个平台包括一个丝网印刷碳电极（SPCE），加上一个新的纳米粒子为基础的电方法，允许快速和连续检测鉴定原位细胞增殖的影响。检测是基于与特异性抗体反应的细胞表面蛋白质纳米粒子。利用催化性质上氢形成的金球使我们能够纳米粒子，从而，相应的附加癌细胞。这催化效果察和纳米粒子但用于生物传感由于其简单的合成催化目前由氢离子的还原生成记录和相关的数量感兴趣的细胞。该方法的依据是质子氢的催化还原的金球存在在酸性介质中，在的潜力。这种方法使用催化电流产生的氢离子减少，已受聘为双方的铂检测（二）28 金（一金球，所有优势，后者带来的生物传感应用。为了评估这个工具作为细胞传感器探测效能对肿瘤细胞的检测，我们研究人类是否 HMy2肿瘤细胞株（HLA - DR抗原阳性的B细胞II类）可实在是否发现另一个人肿瘤PC - 3细胞线（HLA - DR的类前列腺癌负）没有检测。肿瘤细胞可以生长在SPCE表面呈现出类似的形态，在其他传统的细胞基板上成长。孵化与细胞结合，以金球抗体进行任何直接或间接的方式。在前者，商业鼠单克隆抗体（单抗）对何为共轭分子的指示，以金球，而在间接的方法，与非结合抗DR的孵化单克隆抗体其次是二级抗体重视金球。在这两种情况下，免疫能确定的DR -阳性肿瘤细胞，而不是消极的细胞。如预计，间接方法作了更高的信号，因为通过附加若干二级抗体介导的扩增到主抗体。我们提出一个新的类细胞的生物传感器传感器装置为在普通细胞中特定的身份，特别是对肿瘤细胞的鉴定。该方法不需要昂贵的设备，它提供了足够的灵敏度和准确性，这将是一个理想的替代办法护理诊断的未来。由于多方面的，我们越来越多地使用金属纳米粒子设想可能的进一步应用这些智能其他粒子诊断目的。即时几种类型的细胞（如检测，以进行血液测试，检测活检或液体炎症或肿瘤细胞）可进行包括细胞，蛋白质复筛选，甚至的DNA。材料与方法化学品和设备氢氯金三水（HAuCl4 3H2O, 99.9%)和柠檬酸钠为购自Sigma - Aldrich公司（西班牙）。除非另有说明，所有缓冲试剂和其它无机化学品提供的标准差所有化学品被用，所有水溶液制备蒸馏水。磷酸盐缓冲溶液（PBS）由0.013磷酸盐缓冲生理盐水，0.137 M氯化钠，氯化钾和0.003 M（pH值7.4）。分析纯（西班牙）用盐酸。该解决方案是用超纯水制备人类肿瘤细胞株作为研究的目标是在HMy2，一个肿瘤B细胞表面的表达行HLA - DR抗原分子（主要组织相容性复合类二和PC - 3前列腺肿瘤细胞系，这并不表示在DR蛋白。所有细胞培养在RPM