番茄红素的新型生产途径研究.pdfVIP

广东农业科学 2008年第6期 83 番茄红素的新型生产途径研究 薛 姣，胡宗利，陈国平，赵志平，陈绪清 重（庆大学生物工程学院，重庆 400030） 摘 要：研究利用PCR技术扩增出Erwiniaherbicola的crtI基因，并连接到含强启动子Puc的表达载体pRKR5上构 建表达质粒pRKR5-crtI，通过接合转移的方式将其导入光合细菌Rhodobactersphaeroides突变株TC72中，调控氧浓度诱 导工程菌累积红色色素，经HPLC和吸收光谱分析，工程菌中合成的色素为番茄红素，工程菌的生物量 干（重）为2.36g/L， 番茄红素含量可达 1.52mg/g，与其他生产番茄红素的工程菌如大肠杆菌和产朊假丝酵母相比，番茄红素产量有一定程度 的提高。 关键词：番茄红素；crtI基因；Erwiniaherbicola；Rhodobactersphaeroides；异源表达 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：1004-874X2（008）06-0083-05 Studyonthenovelproducingapproachoflycopene XUEJiao，HUZong-li，CHENGuo-ping，ZHAOZhi-ping，CHENXu-qing C（ollegeofBioengineering,ChongqingUniversity,Chongqing400030,China） Abstract：Inthisresearch,thecrtIofErwiniaherbicolawasamplifiedbypolymerasechainreactionandclonedinto pRKR5vectorcontrolledbypucpromoterfromRhodobactersphaeroides,toconstructpRKR5-crtIexpressioncassette.Thenthe expressionconstructwasintroducedintophotosyntheticmutantbacteriaTC72byconjugativetransfer.Inducedbysemiaerobic andaerobicaconditions,thetransformantscouldexpresscrtIhighefficientlyandaccumulatearedpigmentquickly.Thered pigmentwastestifiedaslycopenebyabsorbancespectraanalysisandHPLCanalysis.Theengineeringbacteriacouldgrowupto 2.36g/Landaccumulatelycopeneto1.52mg/g.Comparedwithotherengineeringbacteriaproducinglycopene,suchas EscherichiacoliandCandidautilis,theoutputoflycopeneinthetransformanthadsomeincrease. Keywords ：lycopene；crtIgene；E.herbicola；R.sphaeroides；heterologousexpression 番茄红素是一种重要的类胡萝 卜素，分子式为 于其中所含色素成分复杂致使提取单一组分的成本较 CH，分子量为536.85。最近研究表明，番茄红素的 高。而目前不同生物类胡萝 卜素合成基因相继被成功 40 56 抗氧化性能在天然类胡萝 卜素中最强，能高效猝灭单 克隆，则为利用微生物发酵来获取番茄红素提供了可 线态氧及清除过氧化自由基；通过影响人体细胞的活 能。类胡萝 卜素生物合成相关基因主要簇集在 12.8kb 性以及营养物质