BMP_9基因修饰的兔骨髓间充质干细胞异位成骨实验研究_.pdfVIP

在 PLGA 支架上的黏附、生长状况；X 线摄像及组织切片染色等观察异位成骨情 况。 1. 材 料 1.1 主要仪器及材料： 自动平衡离心机 上海医用分析仪器厂 台式离心机 EPPENDOF （德国） 低温台式离心机 EPPENDOF （日本） 凝胶成像及分析系统 BIO-RAD （美国） 紫外分光光度仪 岛津（日本） 紫外投射仪 UVITEC （英国） 电泳系统BIO-RAD （美国） 超净工作台 THERMO （美国） 电子恒温摇床 THERMO （美国） 电子分析天平 METTLER TOLEDO （瑞典） JTT-5 架盘药物天平 上海医用激光仪器厂 恒温水箱 上海跃进医疗器械厂 加样器 EPPENDOF （德国） 移液器 SOCOREX （瑞士） DELTA 320pH 计 METTLER TOLEDO （瑞典） 超低温冰箱 THERMO （美国） 医用冰箱SANYO （日本） 磁力搅拌器 上海司乐仪器有限公司 倒置荧光相差显微镜 NIKON （日本） 电子显微摄像系统NIKON （日本） 液氮容器 成都金凤液氮容器公司 压力蒸汽消毒器 HTRAYAMA （日本） 电热鼓风干燥箱 上海福玛实验设备有限公司 CO2 孵箱BIO-RAD （美国） 9 Milli －Q Biocel 超纯水系统 Millipore （美国） 制冰机 SCOTSMAN(美国) 流式细胞仪 BECTON DICKINSON （美国） 酶标仪 TECAN （奥地利） 扫描电镜 AMRAY(美国) 切缝包，骨穿针,肝素，等常规药品及材料。 1.2 菌株及质粒： 菌株：E.coli DH5α(本实验室保存); 质粒：pcDNABMP-9 （重庆医科大学附属儿童医院康权博士构建并惠赠）； pIRES2-EGFP 质粒（重庆医科大学康权博士馈赠）； 1.3 主要试剂及配制: 1.3.1 主要试剂： DMEM/F-12 培养基 GIBCO （美国） 特级胎牛血清 TBD （杭州四季青公司） 青霉素 华北制药股份有限公司 链霉素 华北制药股份有限公司 HEPES SIGMA (美国) 限制性内切酶Nhe I 、Xho I NEB (美国) GenExtractTM 质粒中量抽提无内毒素试剂盒 道普生物科技（北京） 胰蛋白酶 SIGMA (美国) DMSO 华美公司 Lipofectamine TM2000 INVITROGEN(美国) ALP 测定试剂盒 建成生物工程研究所(南京) PLGA 材料 岱罡科技有限公司（济南） 其它常规试剂等。 1.3.2 试剂配制： •细胞培养相关试剂