样品检测过程中的假阳性、.pptVIP

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样品检测过程中的假阳性、假阴性结果分析 天大天发科技有限公司 易泰实验室 一.样品检测过程中的假阳性结果分析 1. 污染(包括实验环境、实验器材、实验操作等) 2.葡聚糖的干扰 3.鲎试剂(预设OD值的确定) 4.特殊样品 1.污染 a.实验环境:没有明显空气流动的洁净工作室即可。(操作规程:实验应在洁净室或洁净工作台内进行。) b.实验器材:规范程序 C.实验操作:避免污染 2.葡聚糖 β-D-glucan在自然界的分布很广,主要存在担子菌、真菌、地衣类、高等植物以及酵母、藻类的菌体成分中。另外,某些使用人造纤维制作的人工肾透析膜上也含有类似物质。 含有葡聚糖样品反应时间法分析结果 含葡聚糖样品反应速率法分析结果 内毒素反应曲线 葡聚糖反应曲线 内毒素和葡聚糖反应曲线 葡聚糖反应曲线和速率曲线 内毒素反应曲线和速率曲线 3.鲎试剂的影响(预设OD值的确定) 反应时间法是预设一个OD值,测定从反应开始到反应溶液达到该OD值的时间,从而达到测定反应溶液中内毒素浓度的目的。 该OD值是反应进入快速反应期的吸光度。 我们采用与国际上其他仪器相同的取值(0.02),该点在反应曲线上的位置为浊度开始快速变化的时期,该取值能够快速、稳定获得反应时间。 内毒素反应曲线(某厂家鲎试剂) 内毒素反应曲线(某厂家鲎试剂) 4.特殊样品 某些样品会和鲎试剂中某些成分发生化学反应,形成浊度变化,造成假阳性。 如碳酸氢钠注射液 未调整PH反应曲线 调整PH至7-7.5反应曲线 调整PH至6-7反应曲线 一.样品检测过程中的假阴性结果分析 1.器材处理 2.鲎试剂、内毒素标准品失效 3.样品回收率 4.特殊反应 1.器材处理 实验器材处理不当,不但容易造成假阳性,还容易造成假阴性。实验器材在经过洗液浸泡后,如果冲洗不干净,有酸性物质残留,会造成实验结果出现假阴性。 2.鲎试剂、内毒素标准品失效 鲎试剂保存使用不当,使鲎试剂失效,实验结果表现为假阴性。 内毒素标准品失效,定标出现偏差,造成假阴性。 3.样品回收率 实验中,样品回收管是必须测定的,对此,药典有明确规定。 回收率是否符合药典规定(50-200%),是测定值是否真实可靠的指标。 对于一些PH较低或较高的样品,需经PH调整后,再进行测定。 4.特殊反应 某些特殊样品,如不进行预处理,会造成实验结果的假阴性。 如血红蛋白 回收管制备时,稀释后加内毒素标准品 回收管制备时,稀释前加内毒素标准品 补充 1.相同批号鲎试剂 2.为确保所选择的处理方法能有效的排除干扰且不会使内毒素失去活性,要使用预先添加了标准内毒素再经过处理的供试品溶液进行干扰试验。 谢谢大家! * * * *

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