人CAT启动子红色荧光蛋白报告基因载体的构建及功能鉴定.pdfVIP

南方医科大学学报 2149 2009;29(11)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% (J%South%Med%Univ) · · 人CAT 启动子红色荧光蛋白报告基因载体 构建及功能鉴定 姚 琦 黄 劭 刘亚伟 刘靖华 姜 勇 南方医科大学病理生理学教研室和广东省蛋白 组学重点实验室 广东 ， ， ， ， （ ， 广州510515 ） 摘要 目 构建人过氧化氢酶 CAT 启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体 为进一步研究 CAT 表达调控奠定基 ： （ ） ， 础 方法 以人类基因组DNA 为模板 PCR 获得 -404~+16 大小的启动子片段 将其定向插入pDsRed1-1 载体 构建 。 ， ， ， pDsRed-CATp 红色荧光蛋白报告基因载体 瞬时转染NIH/3T3 细胞 观察 CAT 启动子对 H O 刺激的反应 结果 。 ， 2 2 。 pDsRed-CATp 经双酶切及DNA 测序分析鉴定准确无误 该载体瞬时转染NIH/3T3 细胞 静息状态呈现弱转录 H O ； ， ， 2 2 刺激后 转录水平明显增强 结论 成功构建 CAT 启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体 对 H O 刺激反应良好 ， 。 ， 2 2 ， 为研究 CAT 基因表达调控提供了有效的工具。 关键词 过氧化氢酶 红色荧光蛋白 调节基因 报告基因 ： ； ； ； 中图分类号 Q291;%R392.1%%%%%%%% 文献标识码 A%%%%%%%% 文章编号 1673-4254 2009 11-2149-03 ： ： ： （ ） Construction and functional identification of red fluorescent protein reporter plasmid for human catalase gene YAO%Qi,%HUANG%Shao,%LIU%Ya-wei,%LIU%Jing-hua,%JIANG%Yong Key% Laboratory% of% Functional% Proteomics% of% Guangdong% Province, % Department% of% Pat