毛细管电泳-电致化学发光法同时测定尿液中的脯氨酸和洛美沙星的浓度.pdfVIP

毛细管电泳- 电致化学发光法同时测定尿液中的脯氨 酸和洛美沙星的浓度1 1 1 1 1，2 孙汉文* ，王立新 ，苏明 ，李丽清 1．河北大学化学与环境科学学院，河北省分析科学技术重点实验室，河北保定（071002 ） 2．泰山学院化学系，山东泰安 （ 271021 ） E-mail ：hanwen@ 摘 要：目的：提出毛细管电泳- 电致化学发光同时测定脯氨酸和洛美沙星的新方法。方法： 就毛细管电泳流动相和检测池中磷酸盐缓冲液pH 和浓度、进样时间和电压，分离电压,检测 电位和场致效应等实验条件对脯氨酸和洛美沙星的分离和联吡啶钌电致化学发光检测的影 响加以详细考察和条件优化。结果：在优化的实验条件下，脯氨酸和洛美沙星的标准曲线分 别在0.1–80µg·mL-1 和0.2–80µg·mL-1 的浓度范围内呈良好的线性，检出限(S/N=3)分别为 0.03 和0.06µg·mL-1 。脯氨酸和洛美沙星的浓度均为6µg·mL-1 的标准混合液经11 次测定，其发光 强度的相对标准偏差分别为3.2%和3.7% ，迁移时间的相对标准偏差分别为1.0% 和1.2%。 本方法已成功用于尿液中脯氨酸和洛美沙星的同时检测，回收率在94.2% 和97.2% 范围内。 探讨了电致化学发光的可能机理。结论：本方法简便、灵敏、可靠，可用于临床常规检测和 药代动力学研究。 关键词：毛细管电泳；电化学发光；洛美沙星；脯氨酸；尿液 中图分类号：R917 文献标示号：A 脯氨酸(Proline)是一种氨基酸类药物。胶原蛋白中含有丰富的脯氨酸，在胶原蛋白的代 谢中，脯氨酸通过羟基化形成羟脯氨酸，脯氨酸通过尿液排出体外。体液中脯氨酸含量的变 化与多种疾病有关，如骨病、癌症、慢性尿毒症等[1] 。 洛美沙星（Lomefloxacin ）为第三代 喹诺酮类广谱抗菌药，具有抗菌谱广、口服吸收好、能迅速分布到各组织、血液浓度高、半 衰期长等特点，而用于治疗敏感细菌引起的呼吸道感染，泌尿生殖系统感染，腹腔、胆道、 肠道及伤寒等感染[2]。在临床药理研究中需适时检测和了解服药后不同阶段各组织中该药 物的含量, 因此，建立灵敏、可靠、快速的分析方法是十分必要的。目前，测定脯氨酸的方 [3] [4] [5] [6] [7] 法有分光光度法 、质谱法 、化学发光法 、液相色谱法 、毛细管电泳法 等。测定洛美 沙星的方法有高效液相色谱法[8] 、荧光法[9] 、毛细管电泳法[10] 、流动注射化学发光法[11] 等。 电致化学发光（ECL ）结合了化学发光技术和电化学技术两者的优点，具有高灵敏度、 高选择性，以及高的抗干扰能力，动态范围宽等优点，已广泛被应用于环境分析、食品分析、 药物分析及免疫分析等分析领域。毛细管电泳(CE)分离-联吡啶钌[Ru(bpy)32+] 电致化学发光 检测是近年来发展的一种新方法, 已成功应用于一些胺类药物和氨基酸等生化物质的检测 [12-15] 。本实验通过优化毛细管电泳分离和电致化学发光检测条件，建立了有效分离和同时检 测人体尿液中脯氨酸和洛美沙星的新方法。 1．实验部分 1.1 仪器 所有的实验均在 MPI-B 型毛细管电泳电化学发光检测仪（西安瑞迈电子科技有限公 司）上完成。该检测仪由四部分组成：数控电化学恒电位仪（参数：电位范围, -10V–10V; 电 1本课题得到教育部博士点学科基金项目 (No.20050075003) 的资助。 - 1 - 流范围, ±250mA;参比电极输入阻抗,1012Ω; 灵