鸡MHC_链基因的克隆和表达及其抗体制备.pdfVIP

安徽农业大学学报 , 2006, 33 ( 1) : 5155 Jou rnal of A nhu i A gricu ltural U n iversity β ① 鸡 M HC Ⅱ 链基因的克隆和表达及其抗体制备 1 1 2 1 1 徐志本 ,余为一 ,仲大莲 ,李槿年 ,周 　杰 ( 1安徽农业大学动物科技学院 ,合肥 230036; 2 中国科技大学生命科学学院 ,合肥 230026) β 摘 　要 :用 自行设计的 1对引物 ,通过 R TPCR 从鸡脾细胞中分别克隆了鸡 MHC Ⅱ 链基因片段 ,大小为 798 ( ) bp 。核苷酸测序结果表明 ,与已登录的基因序列同源性为 95% 。将该基因片段插入含谷胱甘肽 GST 基因的质粒 β β p GEX4T1,构建了 p GEX4T1chMHC Ⅱ 。经诱导表达 ,获得分子大小约为 53 000 的融合蛋白,其中 chMHC Ⅱ β β 链大小约 27 000。经亲和层析 ,获得纯化 GST 融合蛋白,进一步用此蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗鸡 MHC Ⅱ 链 抗体 。经过琼扩和 EL ISA 检测 ,表明该融合蛋白具有良好的抗原性 。 β 关键词 :鸡 MHC Ⅱ; 链基因;克隆;原核表达 　　中图分类号 : S8312; S852 4 文献标识码 : A 文章编号 : 1672352X (2006) 0 1005105 C lon in g an d expression of the gen e fragm en t en cod in g β ch icken M HC Ⅱ cha in an d its an tibody prepara tion 1 1 2 1 1 XU Zh iben , YU W eiyi , ZHON G D aliang , L I J ingn ian , ZHOU J ie ( 1. Co llege of A n im al Science and Technology, A nhu i A gricu ltural U n iversity, H efei 230