中药材DNA分子标记研究的技术问题__RAPD实验技术和方法学论述.pdfVIP

·178 · 中草药　Ch in e se T rad it ion a l an d H erb a l D ru g s　2002 年第 33 卷第 2 期 中药材D NA 分子标记研究的技术问题 RA PD 实验技术和方法学论述 1 2 郭宝林 , 戴　波 ( 1 北京中医药大学 中药鉴定室, 北京　100094; 　2 云南大学, 云南 昆明　65009 1) 摘　要: 主要根据作者的经验, 对 实验技术中的扩增仪及扩增程度、 模板浓度及纯度、引物的种类与浓 RA PD DN A 度、 酶、缓冲系统、 2+ 、 的浓度、设立空白对照、扩增产物鉴定、条带统计和同源性认定、 反应程 T aq M g dN T P RA PD 序标准化等问题进行了论述, 其中降解了的DN A 模板在不同的浓度时会产生不同的扩增式样, 国产 T aq 酶的不同 批次间会产生较大的扩增差异为首次报道, 并提供了获得清晰条带的电泳策略。概述了RA PD 的主要特点和适用 范围。 关键词: RA PD 技术; DN A 模板; T aq 酶 中图分类号: R 282. 1　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2002) 02 0 178 03 Som e techn ica l problem s in stud ie s on D NA m arker s of Ch in e se m a ter ia m ed ica D iscussin g on RA PD techn ology an d m ethodology 1 2 GU O B ao lin , DA I Bo ( 1. L abo rato ry o f Ch in e se M ater ia M ed ica Iden t ificat ion , B eij ing U n iver sity o f TCM , B eij ing 100094, Ch in a; 2. Yunn an U n iver sity , Kunm ing Yunn an 65009 1, Ch in a) Key words: RA PD techn iqu e; DN A m o del; T aq enzym e 　　RA PD 是 DN A 随机 扩 增 多态 性 ( ran dom am p lified 物与模板结合力较弱, 在退火之后, 一般不可直接置于延伸 po lym o rp h ism DN A ) 的简称, 创立于 20 世纪 90 年代, 是 目 温度 70 ℃～ 72 ℃下, 否则引物会失去与模板的结合, 故而 前中药研究者最常使用的DN A 标记技术, 其原理不