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鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒受体蛋白的鉴定 指导教师: 某某某 副教授 本 科 生: 某某某 专 业: 动物医学 汇 报 内 容 一 研究目的与意义 二 实验方法与技术 三 实验结果与讨论 一、研究目的与意义 1、禽流感概述 HA+Sialic acid – Gal - GlcNAc- Host cell Host cell 一、研究目的与意义 2、研究禽流感病毒受体的意义 二、实验方法与技术 方法与技术 一、CEF的培养 取材 分离 纯化 培养 二、病毒的增殖 方法与技术 接种病毒 回收尿囊液 纯化分装 方法与技术 三、膜蛋白提取 方法与技术 四、VOPBA分析 利用VOPBA方法对已提取的CEF细胞膜蛋白进行鉴定。具体操作如图所示: SDS电泳 蛋白转印 丽春红染色 病毒叠加 封闭PVDF膜 抗体孵育 DAB显色鉴定 结果 三、实验结果及讨论 1、SDS电泳结果 泳道1,2:鸡胚成纤维细胞膜蛋白;泳道M:蛋白预染Marker 1 2 M kD 83 25 16.5 32.5 62 47.5 175 2、VOPBA结果 鸡胚成纤维细胞膜上禽流感病毒疑似受体条带 三、实验结果及讨论 16.5 25 32.5 47.5 83 175 62 M 1 2 3 R1 R2 R5 R6 R3 R4 R8 R7 3、结论 本次实验成功得到了 条疑似禽流感受体的蛋白条带,初步鉴定了在CEF膜上的禽流感病毒受体,为进一步研究打下了基础。 由于方法的局限性,所得到了蛋白条带还需进一步分离纯化,才能确认为禽流感病毒的受体蛋白。 三、实验结果及讨论
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