海水和贝类中软骨藻酸的酶联免疫吸附分析方法研究.pdfVIP

第 38 卷 　第 5 期 卫 　生 　研 　究 Vol . 38 　No . 5 6　　22 2009 年 　9 月 JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH 　　　 Sep . 　2009 ( ) 文章编号 2009 ·实验研究 · 海水和贝类中软骨藻酸的酶联免疫吸附分析方法研究 刘仁沿 　许道艳 　董玉华 　梁玉波1 国家海洋环境监测中心 ,大连 　116023 ( ) 摘要 : 目的　建立间接竞争酶联免疫吸附分析 ELISA 方法测定海水样品和海洋贝类中赤潮毒素记忆缺 ( ) ( ) 失性贝毒主要成分软骨藻酸 DA 。方法 　采用碳二亚胺法 ,将半抗原 DA 分别与载体蛋白卵清蛋白 OVA ( ) 和牛血清白蛋白 BSA 偶联 ,得到包被抗原和免疫抗原 。以DABSA 做为免疫抗原 ,免疫 BALBc 小鼠,制备 多克隆抗体 ,建立间接竞争 ELISA 方法分析检测海水样品和海洋贝类中的软骨藻酸 。结果 　最低检出限为 ( μ ) 100ngml 对于贝相当于 4 gg ;海水样品回收率为 832 %～1247 % ,批内变异系数在 47 %～59 %之间;贝 类样品回收率为 859 %～999 % ,批内变异系数 24 %～71 %之间。结论 　建立的 ELISA 方法检测海洋贝 类中DA 可以满足国际规定的安全限值 。 关键词 :软骨藻酸 　多克隆抗体 　酶联免疫吸附分析 　海产品 中图分类号 :R15551 　　　　　　文献标识码 :B A indirect competitive EL ISA to detect domoic acid in sea water and shellf ish L IU Renyan , XU Daoyan , DONG Yuhua , L IANG Yubo National Marine Environmental Monitoring Center , Dalian 　116023 , China Abstract :Objective 　A competitive enzymelinked immunosorbent assay ( ELISA) was developed for measurent ( ) ( ) domoic acid DA in seawater and shellfish . Methods 　DA was coupled to bovine serum albu