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H5N1流感病毒M1蛋白免疫制备的单克隆抗体的研究.pdf
主 塞墅塑 痘童堂 查 至 旦笙垫鲞箜 塑 ! 』垦xp linVir01,Decenber2009,V。1.23,No.6
. 论 著 .
H5N1流感病毒 M1蛋 白免疫制备的
单克隆抗体的研究
陈爱琚,姚立红,郭建强 ,徐一,刘晓宇,贾润清,张智清
【摘要】 目的 制备抗人流感病毒H5N1株Ml蛋 白的单克隆抗体,为流感的快速诊断和研究提
供新的工具 。方法 应用在大肠埃希菌 中表达 的人 H5N1亚型禽流感病毒 (A/Antiui/1/2005)株 Ml蛋
白,以纯化的表达产物免疫 BALB/c小 鼠,取脾细胞与 sp2/0细胞系作细胞融合后 ,间接 ELISA法筛选
阳性的杂交瘤细胞 ,并应用间接免疫荧光法对抗体 的特异性进行鉴定 。结果 获得 3株能稳定分泌
抗禽流感病毒 M1抗原的McAb杂交瘤细胞株 ,交叉反应试验及 间接免疫荧光检测表明,三株 McAb具
有型特异性 。结论 用 H5N1禽流感病毒 Ml蛋 白免疫制备的单克隆抗体 ,具有一定的交叉反应性,
可用于多种亚型 甲型流感病毒的检测 。
【主题词】 流感病毒A型; 膜蛋白质类; 抗体,单克隆; 杂交瘤
Studyonpreparationandidentification ofmonoclonalna tibodiesimmunizedwithH5N1influenzavirusM 1
protein CHENAi4~n,YAoLi-hong,GUOJian-qiang,XUY,UUXiao-yu.JIARun-qing,ZHANGz
qing.StateKeyLaboratoryforMolecularVirologyandGeneticEngineering.InstituteforViralDiseaseControland
Prevention,ChineseCenterforDiseaseControfand Preventoin,Be哦ng100052,China
A【bstract】 Objective Topreparemonoclonalantibodiesspecificf0rM1proteinofH5N1subtypehuman
influenzavirus.thisWOrkmayprovidenew toolinrapiddiagnosisandstudyoftypeA influenzavirus.Methods
BALB/cmicewereimmunizedwithpurifiedrecombinantH5Nl(A/Anhui/1/2005)/M1proteinexpressed inE .
col.Spleencellsoftheimmunizedmicewerefusedwith sp2/0 celistoproducehybfidomacelllines.ELISAwas
peIf0rmedtoidentifyt}lemonoclonalantibodyagainstM1proteinofH5N1.Immunoflunrescenceassay(IFA)were
appliedtoidentifythespecificityoftheseantibodies.Results Threehybfidomacelllinessteadily secretinganti·
H5N1/Ml McAb were ob~ined. and theirCROSS reactivity wasconfirmed by cross—reaction testand IFA.
Conclusion Monoclonalantibodiesimmunizedwi山 H5N1subtype influenzavirusMlprotein arecross.reactive.
whichcanbeusedtodetectdifferentsubtypeofinfluenzeviurstypeA.
【Keywords】 InnuenzaAvirus; Membraneproteins; Antibodies,monoclonal; Hybridomas
人禽流感是由禽 甲型流感病毒的某些亚型中的 的M1基因编码区非常保守 ,变异很少 ,具有型的特
一 些毒株引起的人 的急性呼吸道传染病 ,而重症患
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