P16、CyclinD1、PTEN在皮肤基底细胞癌中的表达及意义.pdf

目 录 1 P16 、CyclinD 1、PTEN 在皮肤基底细胞癌中的表达及意义……………1 1.1 摘要（中文）…………………………………………………………1 1.2 摘要（英文）…………………………………………………………3 1.3 前言…………………………………………………………………...7 1.4 材料与方法………………………………………………………….10 1.5 结果………………………………………………………………….17 1.6 讨论………………………………………………………………….27 1.7 结论………………………………………………………………….37 1.8 参考文献…………………………………………………………….38 1.9 英汉缩略词对照表………………………………………………….44 2 致谢………………………………………………………………………..46 3 P16 抑癌机制及其在皮肤肿瘤中的作用研究进展（综述）……………47 P16 、CyclinD 1、PTEN 在皮肤基底细胞癌中的表达及意义 摘 要 背景与目的：皮肤基底细胞癌 （cutaneous basal cell carcinoma, BCC ） 是人类最常见的皮肤恶性肿瘤，主要由多功能性基底依赖间质细胞组成， [1] 并能分化成表皮或附属器的低度恶性肿瘤 。研究证明：该肿瘤的形成与 发展是在外因与内因作用下多步骤渐进、综合作用的结果，其中癌细胞的 凋亡、癌基因的激活与抑癌基因的失活以及细胞增殖分裂的调控失常是肿 [2] 瘤发生发展的重要因素 。本研究旨在通过免疫组化方法及专业图像分析 软件观察分析P16 、CyclinD 1、PTEN 在皮肤基底细胞癌中的表达情况及相 互关系，探讨P16 、CyclinD 1、PTEN 在皮肤基底细胞癌发生发展中的作用 及意义，提供皮肤基底细胞癌的病因及发病机制研究的理论基础。 方法：用免疫组织化学技术，EnVision 免疫染色法检测40 例皮肤基底 细胞癌石蜡包埋组织、15 例正常皮肤组织中P16 、CyclinD 1、PTEN 蛋白 的表达情况。采用BH-2 型OLYMPUS 光学显微镜随机检测5 个不重叠视 野（×200 ）,用 CCD 数码相机采集图像。采集后的图像用美国 Media Cybernetics 公司的专业图像分析软件 （Image pro plu6.0 ，IPP 6.0 ）对阳性 染色结果进行半定量分析，并用平均光密度值（Optical density mean ）作为 阳性染色评价指标。检测一张切片5 个视野的平均光密度，平均值作为该 切片的平均光密度，再将每一组的每张切片的平均光密度作平均值及标准 差进行样本正态分布检验及方差齐性检验。经SPSS17.0 软件验证皮肤基底 细胞癌及正常皮肤组织中的蛋白平均光密度均服从正态分布，但总体方差 不齐，遂用两独立样本校正t 检验 （t ′检验）进行统计分析。皮肤基底细 胞癌中三种蛋白表达的两两关系用等级秩相关Spearman 分析。 结果：1.P16 在皮肤基底细胞癌中的平均光密度值低于正常皮肤组织， - 1 - 其经检验差异有统计学意义（P=0.00... ＜0.05 ）；CyclinD 1 在皮肤基底细胞 癌中的平均光密度值明显高于正常皮肤组织，经检验其差异有统计学意义 （P=0.00... ＜0.05 ）；PTEN 在皮肤基底细胞癌中的平均光密度值低于正常 皮肤组织，经检验其差异有统计学意义（P=0.00... ＜0.05 ）；2.三者中两两 相关性经统计学分析显示，皮肤基底细胞癌组织中，P16 与CyclinD 1 蛋白 表达呈负相关（r=-0.497 ），其结果有统计学意义（P=0.00...＜0.05 ）；PTEN 与CyclinD 1 蛋白表达呈负相关（r=-0.546 ），其结果有统计学意义（P=0.00... ＜0.05 ）；P16 与 PTEN 蛋白表达呈显著正相关（r=0.742 ），其结果有统