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生物选修3第一章知识点 第1节 DNA重组技术的基本工具 1、基因工程的基础理论 生物化学、分子生物学和微生物学 2、基因工程的定义 按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品 ★定向改造生物性状，目的性强 3、基因工程的三种操作工具 限制酶、DNA连接酶、运载体 4、限制酶的作用特点 能识别特定的核苷酸序列，并在特点的位点切割 5、限制酶切割DNA产生的两种末端的区别 中轴线的两侧切割，中轴线切割 6、基因工程限制酶识别序列的规律 沿中轴线反向对称 7、限制酶的作用位点 两个核苷酸之间的磷酸二酯键 8、DNA连接酶的作用 将两个DNA片段拼接成新的DNA分子，作用于两个核苷 酸之间的磷酸二酯键 9、两种连接酶的区别 E·coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端 10、基因载体的条件 （1）有一个和多个限制酶切割位点 （2）能在宿主细胞中自我复制 （3）有特殊的标记基因，以便筛选 11、常用的运载体 质粒、 噬菌体的衍生物、动植物病毒 质粒：细胞质的小型环状DNA（不是细胞器） 第2节 基因工程的基本操作步骤 基因工程的基本操作步骤 （1）目的基因的获取 （2）基因表达载体的构建 （3）将目的基因导入受体细胞（4）目的基因的检测与鉴定 2、目的基因的概念及举例 目的基因主要是编码蛋白质的结构基因 3、获取目的基因的方法 （1）从基因文库中获取 （2）人工合成 （PCR技术扩增和直接合成） 4、基因文库、基因组文库、cDNA文库 （1）基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因 （2）基因组文库：含有全部基因 （3）cDNA文库：含有部分基因 5、PCR技术的原理、前提和特点 原理：DNA的半保留复制 前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物 特点：体外、需高温 6、构建基因表达载体的目的 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用 7、基因表达载体的组成及其作用 目的基因、启动子、终止子和标记基因 启动子：RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动转录 标记基因：用于鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而筛选出含有目的基因的受体细胞 8、目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的方法 植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 农杆菌转化法：（感染双子叶和裸子植物、T—DNA） 动物：显微注射法 微生物：用钙离子处理使细胞称为感受态细胞 9、目的基因的分子水平的检测方法和个体生物学水平的鉴定方法 （1）首先，检测DNA：DNA分子杂交技术 其次，检测mRNA：分子杂交 最后，检测蛋白质：抗原—抗体杂交 （2）个体水平：“接种”试验 第3节 基因工程的应用 1、植物基因工程的应用 抗虫转基因植物、抗病转基因植物、抗逆转基因植物、利用转基因改良植物的品质 2、动物基因工程的应用 用于提高动物生长速度、用于改善畜产品的品质、 用转基因动物生产药物、用转基因动物作器官移植的供体 3、基因工程药物举例 细胞因子、抗体、疫苗、激素 4、基因治疗的定义及分类 把正常基因导入病人体内使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的 体内基因治疗、体外基因治疗 第4节 蛋白质工程的崛起 1、蛋白质工程崛起的原因 为了制造出自然界没有的，符合人类生产和生活需要的蛋白质，而基因工程在原则上只能产生自然界已存在的蛋白质 2、蛋白质工程的目标 根据人们对蛋白质功能的特殊需求，对蛋白质的结构进行分子设计 3、蛋白质工程的原理和操作对象 基因改造 基因 4、蛋白质工程的概念 以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求 5、蛋白质工程的流程图 分子设计 DNA合成 折叠 翻译 转录 mRNA 生物功能 预期功能 蛋白质 三维结构 氨基酸序列多肽链 基因 DNA