活性及其基因突变分析.pdfVIP

维普资讯 ·35O · JClinCardiol(China)，May2008，Vol24，No5 · I临 床 研 究 · 家族性高胆固醇血症家系低密度脂蛋 白受体 活性及其基因突变分析* 许瑛杰 王绿娅 蔺洁 吴成爱 勇强 杨娅 刘舒 潘晓冬 杜兰平 [摘要] 目的：对 1例临床诊断为家族性高胆固醇血症(FH)纯合子患者家系进行低密度脂蛋 白受体 (LDL— R)活性研究及其基因突变分析 ，旨在探讨其分子病理机制 。方法 ：对先证者及其父母进行血脂、颈动脉超声等检 查 ；采用流式细胞仪检测先证者及其父母外周血淋 巴细胞 LDL—R表达量和功能；以先证者基因组 DNA为模板 ， 扩增载脂蛋 白B100(ApoBlO0)基因 3500区域片断 ，PCR产物进行核苷酸序列分析 ，排 除 由该突变导致家族性 ApoBIO0缺陷症 ；用 降落式 PCR方法 ，在 同一程序 中分别扩增 LDL—R基 因的启动子和全部 18个外显子片段 ， 扩增产物进行核苷酸序列分析 ；发现突变后验证其父母是否存在相 同基 因突变 。结果：先证者血清 TC和 LDL 水平 明显升高、颈动脉 内中膜 明显增厚；LDL—R 的表达量和结合功能显著 下降 (分别为正常人 的 13．6 和 2l_1％)；ApoBlO0基 因3500区域未见突变 ，LDL—R基 因第 1864位碱基 T取代 了G发生纯合错义突变 ，导致第 601位氨基酸天冬氨酸变成脯氨酸(D601Y)。其父母 LDI一R基 因发现了相 同的杂合突变，经检索该突变在我 国 未见报道 。结论 ：证实家系先证者存在 LDL—R基因突变 ，分别来源于父系和母系的遗传 ，该突变可能是家系发病 的分子基础 ；D601Y也可能是我国FH患者 LDL-R基因一种新的突变类型。 [关键词] 家族性高胆 固醇血症 ；低密度脂蛋 白受体 ；基 因突变 [中图分类号] R589．2 [文献标志码] A [文章编号] 1001—1439(2008)05—0350—05 AnalysisofLDL receptorfunctionandgenemutationsin familial homozygoushypercholesterolemia X 【，Y／ng·Jie’ WA．NGLuya L N Jie W 【，Chengai Y0NG Qiang yANG PAN Xiaodong D 【，Lanping (NanhuaUniversity，Hunan，421001，China；BeijingInstituteofHeartLungandBloodVessel Diseases，AnzhenHospital，AffiliatedofCapitalMedicalUniversity，Beijing，100029，China) Abstract Objective：ToscreenthepointmutationofLDLreceptorgeneinHanfamilialhypercholesterolemia (FH)patients，andcharacterizetherelationshipbetweenthegenotypeandthephenotypefordiscussingthemolec— ularpathologicmechanism．Method：W einvestigatedaHanfamilywiththeclinicalphenotypeofhomozygousFH ， anddetectedtheLDLreceptorfunction inperipheralbloodlymphocyteoftheprobandandhisparents．Thenwe scree