一种毛细管电泳化学发光联用系统的改进及应用.pdfVIP

第$# 卷 分析化学 （Q@3RS FTGRT@ ） 研究报告 第# 期 #%%) 年# 月 ?=8B;; U.A9B6/ .H GB6/:856/ ?=;-89: ’,$ V ’, 一种毛细管电泳!化学发光联用系统的改进及应用 赵化章 姜会丽 何友昭# （中国科学技术大学化学系，合肥#$%%# ） 摘 要 在毛细管电泳!化学发光联用研究工作的基础上，提出了一种简单可靠的联用检测接口，并对两端电 极池作了改进。高电位池的改进，解决了支持缓冲液中鲁米诺电解造成的发光信号漂移问题；低电位池的改 进，使发光反应中排出的废液不混入电极缓冲溶液。从而保持化学发光信号的基线稳定，避免发光试剂的损 耗并延长缓冲溶液的使用时间。整个体系简单易行，采用此联用系统和鲁米诺!铁氰化钾间接化学发光法，分 离了绿原酸和芸香苷。本法的检出限达到’( ) * ’% + , -./0 1 ，比毛细管电泳!紫外吸收法降低约# 个数量级。 关键词 毛细管电泳，化学发光，鲁米诺!铁氰化钾 ! 引 言 ［’］ 毛细管电泳（5678//69: ;/;59.7=.9;8 ，?@ ）分离技术出现于2% 年代 ，因其分离效率高、分离速度 快、样品消耗少、分离装置简单及操作成本低等优点，使它成为一种强有力的分离分析技术。但?@ 采 用极小的样品体积和极细的毛细管内径，使光度检测法的灵敏度变差，限制了?@ 的广泛应用。因此， 研究?@ 的高灵敏检测技术是?@ 发展的重要课题。常用的?@ 高灵敏检测技术有荧光法、电化学法和 质谱法等。化学发光（5=;-8/A-8B;5;B5; ，?1 ）法作为一种高灵敏度的检测技术已被联用于高效液相色 ［# ，$ ］ 谱和流动注射分析 。该方法的检测灵敏度高、光学系统简单和信号背景低，但是它的选择性较差。 若它与高效分离方法联用，就能同时满足分析的灵敏度和选择性要求，有利于复杂样品的定性定量分 析。近年来，将?@ 与?1 联用的研究工作取得了很大进展，方肇伦等详细介绍了主要接口类型及存在 ［) ］ 的问题 。?@!?1 联用接口主要有柱端、间隙和套流等类型。套流型是最常用的接口，需要将分离毛 细管插入另一内径较大的反应毛细管中。当反应毛细管的内径很小时，分离毛细管还需要用氢氟酸蚀 刻，操作麻烦，而且小流量试剂常使用昂贵的注射泵控制。因此， ?@!?1 联用应发展简单可靠的检测接 口。本文提出了一种简便的?@!?1 套流接口系统，其组装方便，不需要其它昂贵的驱动装置。同时，将 含鲁米诺缓冲溶液池与高电位电极池分隔开，有效阻止了鲁米诺的电解。出口端采用流动隔离池，及时 排出废液，以使发光信号基线稳定，避免发光试剂的损耗并延长缓冲溶液使用时间。 # 实验部分 # ( ! 试剂 所有试剂均为分析纯。除注明厂商者外，其余试剂均购自上海化学试剂公司。将鲁米诺（C8D-6 公 司）溶于% ( ’ -./0 1 36EF 溶液中配制成% ( % ’ -./0 1 鲁米诺储备液。% ( %% ’ -./0 1 绿原酸和芸香苷储备 液是将绿原酸（G/H6 公司）和芸香苷（G/H6 公司）分别溶于I% J （! ! ）的甲醇水溶液中。上述试剂均避 光保存在) K 的冰箱内。% ( %% ’ -./0 1 铁氰化钾溶液、, -./0 1 氢氧化钠溶液和# * ’% + # -./0 1 硼砂缓冲 溶液（7F L ’% ）均由去离子水配制。 # ( # 仪器 ’##4 型毛细管电泳仪（北京新科技术应用研究所）；MN!’G 型微光检测仪（西安瑞迈电子科技有限 公司）；O? 计算机通过PN!’46 数据采集卡（合肥中国科学技术大学化学科技有限公司）采集和处理数 据。图’ 是?@!?1 联用系统示意图。 #%%$!% ’!’) 收稿；#%