白灵侧耳栽培菌株的不亲和性因子和rDNA-IGS2序列分析.pdf

摘要 本研究以自灵侧耳 Pleurotus 质体单核化技术获得原生质体单核体，通过菌株间单核体杂交进行不亲和性因子分析；通过菌株 内担孢子交配，进行交配型因子次级重组机率的调杏分析；应用TA克隆法进行rDNA—IGS2区域 序列分析，探讨白灵侧耳栽培菌株的遗传特性。 1 不亲和性冈子分析表明，6个菌株有7个不同的A因子，10个不同的B因子。A、B冈子的 相同的A因子A，，B因子均不相同。 2 对6个白灵侧耳菌株的332个担孢子单核体进行了交配型因子的次级重组机率调查分析，其 菌株出现非亲本型B因子，分别占总体的7．2％和1．6％。所有菌株均未出现A因子重组体，表明 A因子很可能仅由1个亚单位组成。 3 隆得到IGS2序列片段21个，大小在1200～3593bp。其中00485菌株得到5个，片段大小在 164和3461 bp；00486菌株6个，片段人小在1200—3416 bp；00489菌株3个，片段大小在1313—3593bp。长片段序列比对表明多数区域一致度较高，仅 在300br,和2000，2500bp区域存在差异。DNAStar软件对长片段12bp以上重复序列寻找分析表 明，IGS2区域存在大量的重复序列，主要集中在150-550bp和2000-,2600bp。 关键词：次级重组，亚重复单位，IGS2测序，交配系统，基因克隆 Abstract characteristicofsixstrainsof with Inthis Pleurotusnebrodensiswere study,thegenetic analysed factors ofthe byprotoplastedmonokaryons secondary incompatibility mating，investigation ratein andrDNA—IGS2 recombination afterTA basidiospores region sequencingcloning． B 1 SevendifferentAandtendifferentfactorsweretestedoutinsixstainsof只nebrodensis by andB were41．7％and among monokaryons．Arepeatfrequency 16．7％。respectively． mating protoplasted 00485was A and identicalB ne ofstrain hadthesamefactorone matingtype A3A48384，which factor， withstrain identicalAandoneidenticalB and withstrain B4 00488，one factor，A4B5 00487， AandBfactorfrom