全自动酶免疫分析仪前处理加样系统检测HBcAb方法的优化.pdfVIP

科 医l药4与l保健《 全自动酶免疫分析仪前处理加样系统检测HBcAb方法的优化 黄燕婷 ， 黄 惠 (1、佛山市第一人民医院，广东 佛山 528000 2、广东省中医院，广东 广州 510120) 摘 要：目的：通过改进 TECAN全 自动酶免疫分析仪前处理加样系统HBcAb的加样模式，减少假阳性及携带污染的问题。方法：分别通过比 较不同加样模式及稀释方案对HBcAb检测结果及携带污染率影响的分析，获得HBcAb的最优检测程序。结果：单次分配和B稀释方案(30ul血清 +870ul生理盐水)是 TECAN全 自动酶免疫分析前处理加样系统检测 HBcAb较为理想的实验方案。结论TECAN全 自动酶免疫分析前处理系统 对HBcAb加样存在携带污染，优化加样方案可减少携带污染，增加加样针的冲洗液量未能降低FIBcAb阳性标本的携带污染现象。 关键词：乙型肝炎病毒核~；~446(HBcAb)；携带污染；实验 TECAN全 自动酶免疫分析前处理加样系 HBcAbf1：30稀释)至相 表 1不同的HBcAb加样模式及稀释方案结果的比较 统能加快加样速度，使实验室工作者从繁重的 应酶标反应板中。b．单次 工作中解脱出来，但同时也带来不少亟待解决 分配模式：独立将 HB— 的问题 ，如携带污染、加液、稀释误差等，使用一 cAb(1：30稀释)加入酶标 次性原装吸头加样固然可以杜绝携带污染 ，但 反应板 中。c．常用 的 会大幅提高成本。本实验从TECAN前处理加 HBcAb稀 释 方 式 ：A． 样系统HBcAb的加样模式及反应原理探讨如 20ul血 清 +580ul生理 何减少携带污染现象，使HBcAb的检测达到优 盐水 (1：30)B．30ul血 清 袁 2不同的加样针冲洗液量对HBcAb结果影响的比较 化。 +87ouI生理盐水n：3o]。 1材料和方法。1．1材料。1．I_1标本来源。 2．1．2标本的加样次序。 2007年门诊病人及体检者共 220例 (120例 第一列：1-8号为阴性标 HBcAb阴性标本，HBcAb强阳性和弱阳性标本 本，第二列：9-16号为弱 表3标本加样后停留时间对HBcAb结果影响的比较 各5O例)。空腹采集静脉血3毫升3000rm／in离 阳性 标 本 ，第 _一列 ： 心l5分钟分离血清，留取不同滴度的HBcAb l7—24号为阳性标本，第 的病人血清标本 (包括阳性 、阴性和弱阳性) 四、五列 ：25—4O号为阴 30 一 20％保存。1．1．2。主要仪器 。瑞士TECAN— 性标本。统计9—16号标 20 GENEsISRsPl50／8全 自动酶免疫分析仪前处 本的假阴性率及 25—4O l0 理系统；BEHRING全 自动酶免疫分析仪后处理 号标 本 的假 阳性 率 。 0 系统 。1．1．3试剂。上海科华生物有限公司 2．1．3结果见表 1。前处 HBcAb—I 酶联 免疫 诊 断试 剂 盒 ，批 号 理加样系统的8支加样针一次可吸取 8个血 不能有效减少前处理加样系统对高滴度HB— 1．2方法。1．2．1实验标本的定值。阴 样，分配后 自动用去离子水冲洗再处理下 8个 cAb加样的携带污染现象。2．3标本加样后停留 性和阳性标本由两名操作熟练的检验人员按操 标本，如此类推。阴性标本后的弱阳性标本若存 时间对HBcAb结果影响的比较。选取弱阳性 作规程用生理盐水对血清标本进行 1：30稀释 在污染可变为阴性；阳性标本后的阴性标本可 (0．2～O．7)和临界值 ±0-3的HBcAb标本 16个， 后加样，加样时间控制在5分钟内，再用全 自动 能被前面的标本所污染。所以，由9一l6号标本 分别于 0分钟、0【分钟、20分钟、3O分钟加入 酶免疫分析仪后处理系统完成其余步骤，确定 的阴转率和25—32号标本的阳转率可以反映不 同一酶标板中，后续的反应步骤由全 自动酶免 标本 OD值；弱阳性标本分别用手工法和强生 同加样模式和稀释方案的携带污染率。33_4O 疫分析仪完成。X2检验统计结果显示弱阳性 化学发光仪VitrosEci定值。所选的HBcAb阴性 号标本仍全为阴性，说明本实验中未存在二次 和临界