脐带干细胞的分化潜能及临床应用.docVIP

脐带间充质干细胞的研究进展 范继桃综述，孙杰审校 摘要：脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs）来自外胚中胚层，是从出生后废弃的胚外组织中分离获得，具有比一般的成体干细胞更强的多能分化能力，而且可以跨胚层分化，可以诱导分化为骨细胞、软骨细胞、内皮细胞、心肌细胞，以及神经细胞、肝脏细胞和胰岛细胞等。在体外培养条件下，hUC-MSCs能快速增殖，传代后3-5天能增殖4-5倍，传代培养10代以上细胞可增殖510倍，且增殖速度无明显降低，传代稳定。这表明脐带来源的干细胞具有多向分化潜能，具有作为细胞替代治疗的种子细胞可能。这篇综述将谈谈hUC-MSCs优势，免疫学特性，分化潜能及其应用的研究进展。 关键字：脐带 间充质干细胞 Wharton’s Jelly（华通胶）分化潜能 应用 干细胞可分为胚胎干细胞（Embryonic Stem Cells，ESCs）和成人干细胞（Adult Stem Cells，ASCs）。由于ESCs不易提取，纯化技术操作困难及畸胎瘤的形成，加上伦理和法律的制约，临床应用非常有限。相比之下，ASCs容易从各组织中提取，如皮肤，骨髓和脂肪等，可较少用在重要器官疾病的临床治疗。考虑到它数量有限、随着年龄的增长，细胞生长和分化能力下降及提取细胞有创性，它的应用变得不太可取[1]。 脐带是胚外组织，由两条动脉，一条静脉，及血管之间的结缔组织和脐带上皮组成。血管之间的结缔组织，简称为华通胶（Wharton’s Jelly），由胶原纤维编织的海绵状结构，蛋白多糖，嵌入式的基质细胞组成。脐带是成体干细胞存在最多的组织之一。其干细胞种类丰富，包括造血、间充质、神经和内皮干细胞等。hUC-MSCs主要位于华通胶、脐血管周围和血管内皮下等。2003年，Mitchell等[2]成功从猪和人脐带分离出基质细胞，Romanov等[3]从脐静脉的内皮层分离出间充质样细胞。 1、hUC-MSCs的优势 hUC-MSCs有一些特殊的优势。（1）脐带在分娩后被丢弃，不存在伦理争议；（2）细胞提取操作简单、无创性，脐带细胞数量相对充足，获得大量干细胞不需要长时间培养和体外广泛扩增;（3）分离得到脐血间充质干细胞（human umbilical cord blood mesenchymal stem cells ，hUCB-MSCs）的成功率低至6％，而hUC-MSCs的成功率达100％，并避免损失脐血中的造血干细胞;（4）由于胎盘屏障的存在，hUC-MSCs细菌和病毒感染的风险比来自骨髓，外周血，脂肪等的干细胞要低;（5）初步研究表明，hUC-MSCs无MHCII类分子表达及低表达MHCI分子，可能是一个异体细胞移植的来源。 2、hUC-MSCs的免疫学特性 hUC-MSCs的免疫原性非常低，其表面表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、淋巴细胞功能相关抗原LFA-3、干扰素相关细胞粘附因子ICAM-1抗原。有研究发现，hUC-MSCs抑制刀豆蛋白A刺激的脾淋巴细胞增殖反应和刺激T细胞增殖的双向混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction，MLR），但既不抑制非刺激的脾淋巴细胞增殖，也不刺激T细胞增殖的单向MLR[4]。也表达免疫调节分子，如血管内皮生长因子（VEGF），IL-6，但没有表达共刺激表面抗原，如CD40，CD80和CD86[4]，这极大限制了CD3标记的T淋巴细胞和单核细胞的活化增殖。这些分子是效应性T细胞激活所必需的，共刺激分子缺如，使T细胞活化的第二信号丧失，导致Th细胞的无反应性而促成免疫耐受，表现出耐受原性和低免疫原性。虽然间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）表面存在MHC-Ⅱ类分子，但在与同种异体淋巴细胞共培养时却不能引起细胞增殖反应，即使加入C干扰素诱导MHC-Ⅱ类分子表达，也不能刺激同种异体反应。所以移植同种异体UC-MSCs和同体UC-MSCs所引起的效果是相同的，不会引起免疫排斥反应。这些研究为异体UC-MSCs在组织工程中的应用提供了理论基础。另外有研究表明，hUC-MSCs不仅免疫原性极低，而且有重要的免疫调节作用，MSCs可以在体外共培养中抑制T淋巴细胞、B淋巴细胞和单核细胞的增殖，灭活畸胎瘤细胞[5]。这些从胚胎外组织获得的MSCs扩增转化的过程中，尚未发现其转化成肿瘤。将体外扩增的MSCs静脉注射到体内也是安全的，注射同种MSCs没有免疫原性，可以产生抑制因子抑制宿主和移植细胞之间的免疫反应，同时抑制肿瘤细胞的生长。Cho等[6]发现hUC-MSCs能激活MHCII表达和在体外用γ-干扰素刺激增加MHCI表达，尽管MHCI不活跃及MHCII阴性。当注入炎症区域或重复注入同一个