β淀粉样肽31—35和25—35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用.pdfVIP

医学杂志2009年 l2月第43卷第 12 ChinJpreyMed,December2009,Vo1．43,No．12 1O81 ． 论 著 ． I3淀粉样肽 31—35和 25—35对培养大 鼠皮质 神经元的毒性作用 张晓红 余焕玲 肖荣 向丽 李丽 麻微微 张杰 褚金花 【摘要】 目的 比较 B淀粉样肽 (A31)25．35和31—35对培养大鼠皮质神经元的毒性作用及其途 径的差异 ，以进一步证明A3131-35是诱发神经细胞毒作用的有效较短片段。方法 将新生Wistar大 鼠大脑皮质神经细胞分离、培养48h后 ，按照完全随机设计的方法分对照组、A3125—35(25Ixmol／L)和 A3131-35(25~mol／L)处理组 ，24h后收集细胞。通过四甲基偶氮唑蓝比色法测定细胞的活性、激光 扫描共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化 、单细胞凝胶电泳技术检测 DNA损伤情况、反转录聚合 酶链反应 (RT—PCR)方法检测神经细胞凋亡相关基因(Bcl-2、Bax和 p53)mRNA的表达。每个实验重 复3次。结果 与对照组 [吸光度值 (A值)为 1．038±0．125，荧光强度差值为4．280±0．358]相比， A3125—35和A3131-35处理组细胞的A值 (分别为0．7464-0．071和0．811-40．083)和荧光强度差值 (分 别为3．050±0．240和2．806±0．203)均显著降低 (tA值分别为4．023、5．401，t荧光强度差值值分别为 9．524，7．589，P值均 0．O1)；A3125．35和 A3131—35处理组彗星细胞 的拖尾率分别为 59．0％及 48．5％，尾长分别为 (57．3±4．7)m及 (54．2±6．8)m，与对照组 [拖尾率为4．5％，尾长为 (5．2± 1．1)m]相比均显著增加，差异有统计学意义 (x 率值分别为 99．397和 137．071，t 值分别为 19．058和29．173，P值均 0．01)；A3125—35和A3131-35处理组Bax／Bcl-2分别为 1．27744-0．0762和 1．0330-40．0683，显著高于对照组 (0．2090±0．0991)(t值分别为2．429和2．356，P值均 0．05)； p53／31．actin分别为2．0284-40．2223和 1．9505±0．2725，高于对照组 (1．6560±0．0853)(t值分别为 2．366和2．503，P值均0．05)。结论 A3131—35同A3125-35一样均可引起新生大鼠大脑皮质神经 细胞的损伤，其作用机制可能与A31的直接细胞毒性及其介导的细胞凋亡作用有关。 【关键词】 大脑皮质； 神经元 ； 3-淀粉样肽；神经毒性 Neurotoxieityof amyloidpepfide31-35and25-35toculturedratcorticalneurons ZHANGXiao一 幻 ，YUHuan—ling，XIAO砌ng，XIANGLi，LILi，MAWei—wei，ZHANGJie，CHUJin—hucLSchoolofPublic HealthandFamityMedicine，CapitalMedicalUniversity，Beng100069，China(GraduateStudent，llzywin： DepartmentofInfectiousDiseaseControl，ShanxiCenterforDiseaseControlandPreventoin，Taiyuan030012， China) Correspondingauthor：XIA0Rong．Email：xiaor22@ccmtaedtacn 【Abstract】 Objective Tocomparethetoxicityofmechanism8amyloidpeptide(A31)25—35and 31—35toculturedratcorticalneurons．M ethods Theprimaryratcerebralcorticalneuronsofratwere cultured48hoursandrandomlydividedintocontrol，A3125—35(25I~m