不同直径神经干细胞球慢速低温冻存的研究.pdfVIP

28 卷 6 期 中 国 生 物 医 学 工 程 学 报 Vo1．28 No．6 2009年 12月 ChineseJournalofBiomedicalEngineering Deeember 2oo9 不 同直径神经干细胞球慢速低温冻存的研究 马学虎 侯 颖 石 颖 张 蕾 范文霞 葛 丹 刘天庆 崔占峰 (大连理工大学大连市干细胞与组织工程研究中心，大连 l16024) (牛津大学工程科学 系，英 国牛津 OXl3PJ) 摘 要 ：为提高神经干细胞冻存复苏后的效果及存活率 ，对不 同尺寸与状态 的神经干细胞球进行 了在不 同浓度 DMSO(二甲基亚砜)下的慢速冻存 比较 。首先用 CCK一8试剂盒测定神经干细胞 的生长 曲线 ，然后对处于对数生长 期的3类神经干细胞 (单细胞悬液 ，直径 30～50 m球 ，直径 80～100 m球)分别进行 了7个不 同浓度 (3％，5％， 7％，8％，10％，15％，20％)DMsO的冻存实验 比较 ，并对冻后复苏的细胞进行活性检测和诱导分化 。结果表明，直 径 80～100ttm的神经干细胞球 ，DMSO浓度 8％，复苏后细胞活率 82．9％，且仍具有多项分化潜能。神经干细胞 间 的亲密联系和刻痕信号与直径尺寸共 同作用 ，影响着神经干细胞 的冻存复苏效果。 关键词 ：神经干细胞 ；细胞球直径 ；DMSO；慢速冻存 Slow FreezingCryopreservationofNeuralStem CellSphereswith DifferentDiameter MAXue—Hu HOUYing SHIYing ZHANGLei FANWen—Xia GEDan LIUTian—QingCUIZhan．Feng (DalianRDCenterforStemCelland Engineering，DalianUniversityofTechnology，Dalian116024) (DepartmentofEngineeringScience，UniversityofOxford，OxfordOX13PJ，UK) Abstract：Thisstudyaimstoimprovethesurvivalrateofthecryopreservedneuralstem cell(NSC)sphereswith differentdiametersbyslow freezingwithdifferentDMSO concentrations．AftermeasuringthegrowthcurvebyCCK-8 kit，threesortsofNSCsstatesinlogphase(singlecellsuspension，NSCsphereswithdiametersof30～50tLmand80 — 100tzm)wererespectivelyeryopreservedbysevenconcentrationsofDMSO (3％，5％，7％ ，8％，10％ ，15％ and20％)withthefreezingrateofloC／min．Thenthepost—thaw NSCsweretestedf0rthesurvivalrateandthe differentiationability．ThebestresultwasthatNSCspherewithdiametersof80～100 “m andDMSO concentrationof 8％ achieved the survival rate of82．89％ while remaining the multi—differentiation potentiality．The subtle cooperationofNSCsand spherediametersaffectthesurvivalratetog