游离脂肪酸对βTc6细胞PDX-1表达及胰岛素分泌能力的影响.pdfVIP

生 笠 卷第6期 IntJEndoefinolMetab，November2009．Vo1．29．N0．6 381 · · 论 著 · 游离脂肪酸对 3[Tc6细胞 PDX一1表达 及胰岛素分泌能力的影响 杨立勇 侯毅翰 沈喜妹 严孙杰 【摘要】 目的 探讨游离脂肪酸对胰岛31细胞胰一十二指肠同源盒因子一1(PDX一1)的表达及相 应的p细胞增殖活性和胰岛素分泌功能变化的影响。方法 0．25—1．00mmol／L游离脂肪酸干预小 鼠胰岛素瘤细胞系3[Tc6细胞24～48h，应用 RT—PCR法检测转录因子 PDX一1mRNA表达，四甲基偶 氮唑盐法检测细胞的增殖活性 ，放射免疫法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平，并观察细胞形态变 化。结果 经 0．25～1．00mmol／L游离脂肪酸干预 24h，3[Te6细胞PDX一1mRNA的转录逐步增加 ， 但随着干预时间进一步延长至 48h，PDX一1mRNA的转录逐渐回落，特别是用 1．O0mmol／L游离脂肪 酸干预 48h后，3[Tc6细胞PDX一1mRNA的表达低于空 白对照组。经过0．50～1．00mmol／L游离脂肪 酸24—48h的干预之后，3[Tc6细胞形态学上呈现凋亡趋势 ，细胞增殖活力以及葡萄糖刺激的胰岛素 分泌功能降低，而0．25mmoL／L游离脂肪酸 24h的干预未见此类现象。结论 短时问低浓度的游离 脂肪酸干预可介导p细胞转录因子PDX一1的表达上调，对 p细胞的增殖活性和胰岛素分泌能力无明 显影响；而长时间高浓度的游离脂肪酸干预则将导致 PDX一1mRNA的表达下调，并使 B细胞的增殖 活性和胰岛素分泌能力受损。 【关键词】 游离脂肪酸；3[Tc6细胞；胰一十二指肠同源盒因子一1；胰岛素 EffectsoffreefattyacidsonthePDX·1expressionandinsulinsecretionofBTc6cells YANGLi—yong， HOU —han，SHENXi—mei，YANSunjie．DepartmentofEndocrinology，TheFirstHospitalAffiliatedtoFujian MedicalUniversity，Fuzhou350005，China 【Abstract】 Objective Toinvestigatethechangesofpancreatic—duodenalhomeobox一1(PDX一1)ex— pression，andtheproliferationandinsulinsecretioninducedbyfreefattyacid(FFA)inBcells．Methods Insulinomacellline3[Tc6cellsweretreatedwith0．25—1．00mmol／LFFAfor24_48hours．thenthetranscrip— tionofPDX一1mRNA，the[3Tc6cells proliferationandtheglucosestimulatedinsulinsecretion(GSIS)were determinedbysemi—quantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction(RT—PCR)，MTrviability assayandradioimmunoassayrespectively．Inaddition，themorphologicalchangeof31Tc6cellswasobserved． Results TheexpressionofPDX一1mRNA wasincreasedgraduallyafterinterventionwith0．25—1．00mmol／L FFAfor24hours，butitwasdecreasedwhentheinterveningdurationwasprolongedto48hours，espectially with1．00mmo1／LFFA．Aftertreatingwith0．50—1．00mmo1／LFFAofr2448hours．theBTe6cellstended tobeapoptosisinmorphology，andthecorrespondingprolif