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最新考纲
.微生物的分离与培养某种微生物数量的测定培养基对微生物的选择作用利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用考纲解读
.培养基的种类、营养要求及配制原则无菌技术的具体操作及应用运用相关技术解决微生物的分离与培养等实际问题
知识点一 微生物的培养
议一议:高温灭菌的原理是什么?
想一想:接种过程为什么要在酒精灯的火焰旁进行?
查一查:什么是菌落?它有什么用途?知识点二 微生物的利用
分解纤维素的微生物的分离纤维素分解菌的筛选
想一想:什么叫选择培养基?看一看:纤维素分解菌筛选的原理是什么?
1.培养基的配制原则(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌为6.5~7.5,放线菌为7.5~8.5,真菌为5.0~6.0,培养不同微生物所需pH不同。培养基的营养构成(1)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐2)不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项(1)倒平板的适宜温度是50 ℃左右,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固;(2)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。两种纯化细菌的方法的比较项目 优点 缺点 适用范围 平板划线法 可以观察菌落特征,对混合菌进行分离 不能计数 适用于好氧菌 稀释涂布平板法 可以计数,可以观察菌落特征 吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延 适用于厌氧菌和兼性厌氧菌小贴士
自我校对:营养物质 ②生长繁殖 ③有害的微生物 稀释涂布平板 酒精灯火焰 固体斜面 菌落 不长 污染 甘油管藏 -20 ℃ 选择培养基 尿素 稀释涂布平板法 显微镜直接计数 被测试的条件 非测试因素 纤维素 微生物 倒平板 发酵产纤维素酶 葡萄糖议一议:高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活,从而达到灭菌的目的。想一想:因为这里是一个无菌区,可以避免杂菌污染。查一查:菌落是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,形成的一个肉眼可见的想一想:选择培养基是在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。目的是培养、分离出特定微生物。看一看:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落周围形成透明圈。
,微生物的培养与应用
1.微生物的实验室培养(1)培养基概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。分类和应用 培养基种类 特 点 用 途 物理
性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂,如琼脂 观察微生物的运动、分类、鉴定 固体培养基 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 化学
成分 天然培养基 含化学成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 分类、鉴定 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽) ③培养基配方及营pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 来源 功能 碳源 无机氮源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 ①构成细胞中的物质和一些代谢产物;②既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮源 无机氮源 无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机碳源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 生长因子 维生素、氨基酸、碱基 ①酶和核酸的组成成分;②参与代谢过程中的酶促反应 提醒 ①微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐C、H、O、N的有机化合物既是碳源,又是氮源、能源。有些培养基不需要添加特殊营养物质,生物自己能合成,如大肠杆菌能合成某些维生素,作为特殊营养物质。制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)微生物培养的无菌技术进行无菌操作主要是为了防止外来杂菌的入侵,重点是消毒和灭菌。消毒和灭菌的区别 使用方法 结 果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死
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