表面等离子体子共振传感器研究头孢菌素类药物与白蛋白的相.pdfVIP

第34 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第7 期 2006 年7 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 967 ～ 970 表面等离子体子共振传感器 研究头孢菌素类药物与白蛋白的相互作用 1，2 1 1 1 1 1 1，2 田媛 陈艳华 毕淑云 刘 霞 宋大千 孙 颖 张寒琦# 1 （吉林大学化学学院，长春 130012 ） 2 （湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室，长沙4 10082 ） 摘 要 简单介绍了自行设计并组装的波长扫描型声光可调滤光片表面等离子体子共振（AOTF-SPR ）传感 器装置。应用此SPR 传感器研究了两种头孢菌素类药物与人血清白蛋白的相互作用。采用胺基偶联的方法 将HSA 固定在传感器表面。通过AOTF 快速扫描，记录共振电压的位移，并通过计算得到头孢克洛与人血清 白蛋白相互作用的结合常数为1. 17 × 103 L/ mol ，结合百分率为44 . 22% ；头孢曲松与人血清白蛋白相互作用 的结合常数为2 . 55 × 102 L/ mol ，结合百分率为14 . 79% 。结果表明：AOTF-SPR 传感器装置可用于研究药物与 人血清白蛋白的相互作用。 关键词 声光可调滤光片，表面等离子体子共振，传感器，头孢克洛，头孢曲松，人血清白蛋白 1 引 言 人血清白蛋白（HSA ）是血浆中的一种重要的运输蛋白，它主要维持血液的正常渗透压和运送亲水 ［1］ 分子 。当药物分子进入人体后，通过血浆的贮存、运输，发生药物作用。药物与人血清白蛋白在体内 可产生不同程度的结，这种结合将影响药物的配置及药理作用，对药效学和药动力学起着重要的作用。 人血清白蛋白与许多药物的相互作用已得到了广泛的研究［2 ～ 4 ］。 表面等离子体子共振（SPR ）传感器技术由于其具有不需对反应物进行任何标记，可以实时监测反 ［5 ～ 7 ］ 应物分子之间的相互作用的特点，已被广泛应用到生物技术、环境监测、药物和食品分析领域中 。 声光可调滤光片（AOTF ）是新型的全电子波长选择系统，具有体积小巧、无可动部件、波长调节快 速灵活、调谐范围宽、入射孔径角大、无多级衍射光以及衍射效率高等特点。将AOTF 作为波长扫描型 ［8 ，9 ］ 表面等离子体子共振（SPR ）传感器波长选择系统是一种新方法，这方面的文献报道较少 。本实验利 用自行设计并组装的AOTF-SPR 传感器装置研究了头孢菌素类药物-头孢曲松和头孢克洛与人血清白 蛋白的相互作用，并分别计算了它们的动力学常数及结合百分率。 2 实验部分 2 . 1 试剂 N-羟基琥珀酰亚胺（N-hydroxysuccinimide NHS ）、［N- 乙基-N-（二甲氨基丙基）］碳二亚胺（1-Ethyl-3- （3-dimethylaminopropyl ）carbodiimide EDC ），人血清白蛋白（HSA ）（上海生物制品所）。头孢曲松、头孢 克洛（中国药品生物制品检定所）。巯基丙酸（MPA ）（Sigma 公司）。其它试剂均为分析纯试剂。 pH 7 . 4 0 . 0 1 mol/ L 磷酸盐缓冲溶液（PBS ）。 2. 2 实验装置 ［1