二吲哚甲烷阻断STAT3 通路影响卵巢癌细胞增殖, 凋亡的实验研究.docVIP

二吲哚甲烷阻断STAT3通路影响卵巢癌细胞增殖、凋亡的实验研究 徐长华，邹明花，张献全 （400010重庆，重庆医科大学附属第二医院肿瘤科） [摘要] 目的 观测3’3-二吲哚甲烷（DIM）对体外培养的人卵巢癌细胞SKOV3、A2780增殖、凋亡的影响，并观察STAT3、p-STAT3及凋亡相关蛋白在凋亡过程中的变化，探讨STAT3信号通路在DIM抑制卵巢癌细胞增殖、诱导其凋亡中的作用。方法 采用MTT法检测不同浓度(50、100、200、400、800μmol/L)的DIM在不同的时间点(24、48、72、96h)对SKOV3、A2780细胞增殖的影响；流式细胞术检测DIM对SKOV3、A2780细胞凋亡率和凋亡周期的影响；荧光显微镜观察细胞形态的变化；Western blot检测DIM对STAT3、p-STAT3、caspase3、mcl-1、survivin蛋白表达的影响。结果 DIM对SKOV3、A2780细胞的增殖具有明显的抑制作用，与对照组相比具有显著性差异(PO．05或P0．O1)，并呈现时间和剂量依赖性。分别以100、150μmol/L DIM作用于SKOV3细胞48h后，凋亡率分别为（16.47±3.58）%和（28.77±7.71）%，对照组的凋亡率为（5.16±2.07）%，3组间差异有统计学意义（P0.05）。75μmol/L DIM作用于A2780细胞24h后，G1、G2期细胞比例增加，S期细胞比例降低。高于100μmol/L的DIM处理SKOV3细胞24h后，荧光显微镜下细胞呈现皱缩、变圆，并形成明显的凋亡小体。DIM能上调caspase3蛋白表达(P0.05)，下调mcl-1、survivin及p-STAT3蛋白的表达(PO.05)，但对STAT3总蛋白的表达则无明显影响。结论 DIM能显著抑制卵巢癌SKOV3、A2780细胞的增殖、诱导其凋亡。上述作用可能是通过抑制STAT3的活化,进而上调caspase-3蛋白表达、下调mcl-1、survivin蛋白的表达而起作用的，DIM有可能成为一种有效的抗卵巢癌药物。 [关键词] 3’3-二吲哚甲烷；人卵巢癌细胞；增殖；凋亡；信号传导和转录活化因子3 [中图法分类号] [文献标志码] A Effects of 3, 3’-diindolylmethane on proliferation and apoptosis of human ovarian cancer cells by blocking STAT3 signal pathway Xu Changhua,Zhang Xianquan，Zou Minghua(Department of Oncology, The Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing 400010, China) [Abstract] Objective To evaluate the effects of 3, 3’-Diindolylmethane（DIM）on proliferation and expression of signal trasducerand activator of transcription 3(STAT3,p-STAT3) and that was related to apoptosis in human ovarian cancer lines SKOV3 and A2780 .To determine the role of STAT3 pathway in the antitumor activity of DIM.Methods MTT assay was used to examine the effects of DIM at different concentrations(50，100，200，400，800umol/L)and different time points(24，48，72h and 96 h)on proliferation of SKOV3、A2780 cells．Flow cytometry was used to analyze apoptosis rate and cell cycle.Morphological changes accompanying cell apoptosis were observed with fluorescence microscope after Hoechst 33258 staining.Western blot was used to de