siRNA抑制STGC3基因表达对NIH3T3细胞增殖影响.pdfVIP

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2017-09-01 发布于安徽
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siRNA抑制STGC3基因表达对NIH3T3细胞增殖影响.pdf

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siRNA抑制STGC3基因表达对NIH3T3细胞增殖的影响硕士研究生：廖银花指导教师：贺修胜教授中文摘要目的：STGC3基因是新近克隆的一个候选抑瘤基因。本研究以STGC3基因阳性 3．1． STGC3一siRNA／NIH3T3细胞系。RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学方法，集落形成实验及流式细胞仪分析，观察STGC3基因表达下调后，NIH3T3细胞形态、增殖速度、克隆形成率和细胞周期分布变化。 NIH3T3细胞，G418筛选阳性细胞克隆，经RT-PCR、Westem blotting及免疫细胞化学方法检测结果表明，成功建立了STGC3基因表达下调的NIH3T3细胞系。比，核染色加深，细胞变得细长；细胞生长曲线结果显示：细胞生长速度快(PO．05)；软琼脂集落形成实验结果证实，隆形成率分另IJ为(6．4+1．O)％、(2．2+0．3)％和(2．1+0．3y％， 4 细胞群体中处于S期和G2的细胞数目增加，Go／Gl期细胞数目减少。结论： 1．构建了pSilencer3．1-STGC3一siRNA真核表达载体。 3．siRNA抑制STGC3基因表达可促进NIH3T3细胞增殖。关键词：小干扰RNA，STGC3基因，NIH3T3细胞，细胞增殖 5 of theGrowthinNIH3T3CellLine EffectSTGC3．siRNAon Abstract isacandidatetumor cloned Objective：STGC3gene suppressorgene recently． NIH3T3celllinewasselectedas．a with ofSTGC3and targetpositiveexpression gene observedthe effectafterSTGC3 inhibitedsiRNA． proliferation geneexpressionby vector STGC3Was Methods：pSilencer3．1-STGC3-siRNAexpressiontargettinggene NIH3T3cellline constructedandtransfectedinto cationic stable by liposome．The line G418 cell Wasobtained selection．The by pSilencer3．1-STGC3-siRNA／NIH3T3 levelsofSTGC3mRNAand weredetected and