柽柳泛素交联酶基因的遗传转化及抗逆性分析.pdf

摘耍 摘要 本研究将从极度抗旱、耐盐植物柽柳(Tamarix enzymesE2s)，成功构建到植物表达载体pROKII上， 联酶基因(ubiquitinconjugating 利用农杆菌介导法将泛素交联酶基因导入模式植物烟草基因组中，通过对转基因烟草的 盐、旱胁迫试验，对泛素交联酶基因进行功能验证。 对烟草进行遗传转化，共获得68株卡那霉素抗性芽，从中选出长势最优的15个株 杂交，各转基因株系均出现杂交谱带，证明泛素交联酶基因已整合到烟草基因组中；进 TLll次之、最低的为TL5和TL7。 分别对6个转基因株系进行了NaCl胁迫和干旱胁迫试验，分析逆境胁迫条件下转 基因烟草与非转基因对照烟草的丙二醛(MDA)含量、相对电导率、超氧化物歧化酶 (SOD)活性、叶绿素含量、相对生长量、生根率等指标的变化，结果表明，不同浓度 草生根率保持在50～70％，综上说明，盐胁迫条件下，转基因烟草受害程度明显小于对 照。 干旱胁迫处理10d时，转基因烟草相对电导率平均值低于对照烟草的19．6％；对照 烟草MDA含量为7．7u tam01．g“左 m01．g～，而转基因烟草MDA含量大多在4．9～6．3 右，低于对照烟草；此时转基因烟草的叶绿素平均含量为1．0Img．g～，高于对照的 进行调查，各转基因株系相对生长量在59％～83％范围之间，而对照株系的相对生长量 为29．7％，说明泛素交联酶基因的导入提高了烟草的抗旱能力。 综合以上结果，泛素交联酶基因的组成型表达能够不同程度提高转基因烟草逆境胁 迫下细胞膜稳定性、SOD活性、叶绿素含量及相对生长量，说明泛素交联酶基因具有提 高植物抗旱、耐盐性的功能。 关键词烟草；泛素交联酶基因：遗传转化：NaCl胁迫；干旱胁迫 Abstract Abstract The a gene obtained encodingubiquitinconjugatingenzymes(E2s)wasfromthe TamarixandrossowiicDNA library．The plantgenomicexpression vector,pROKII，with the was constructedandtransferred E2s-gene intoNicotianatabac“mL．via Agrobacterium—mediatedtransformation functionofthe procedure．Moreover,the E2s wasexaminedundersaltand exogenousgene stress． drought resistantlineswere Sixty—eight obtained selection．and15well throughkanamycin lines grown which toPCR allshowed PCR．Southem