耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达.pdfVIP

第 21 卷第 3 期 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vol. 21 　No. 3 　 　 　 　　　　 　 2002 年 5 月 Journal of Wuxi University of Light Industry 　 　 　　　　 May. 　2002 ( ) 文章编号 :1009 - 038X 2002 03 - 0296 - 03 　 β 耐热 半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达 葛佳佳 , 　陈 卫 , 　张 灏 (江南大学 食品学院 ,江苏 无锡 214036) 摘 　要 : 将来自嗜热脂肪芽孢杆菌 IAM11001 的高温乳糖酶基因 bgaB 亚克隆到具强启动子的大 肠杆菌载体 p KK2233 中 ,经 IPTG 诱导后 ,表达出的重组蛋白质仍具有耐高温活性 ,其相对分子 质量与天然蛋白质相似 ,表达量为 1. 5 U/ mg , 比出发菌株高 10 倍. β 关键词 : 嗜热脂肪芽孢杆菌 ; 半乳糖苷酶 ; 表达 ; 大肠杆菌 中图分类号:Q 78 文献标识码 : A β Expression of Thermostable galactosidase Gene in E . coli GE Jiajia , 　CHEN G Wei , 　ZHAN G Hao ( School of Food Science and Technology , Southern Yangtze University , Wuxi 214036 , China) Abstract : A thermostable βgalactosidase gene bgaB of B acill us stearothermophil us was subcloned in to E . coli vector p KK2233. The recombinant protein was produced after induced by IPTG , and showed the same thermostability and molecular mass as the orignal enzyme. The expression level reached 1. 5 U/ mg , 10 times higher than the original strain. Key words : B acill us stearothermophil us ; βgalactosidase ; expression ; E . coli 　　乳糖酶 , 即β ( ) 酶. 据报道 ,嗜热脂肪芽孢杆菌 IAM11001 中含有 3 半乳糖苷酶 E. C. 2. 3. 1. 23 是 一种广泛应用的酶 , 能水解乳糖为半乳糖和葡萄 种乳糖酶基因 , 其中乳糖酶 Ⅱ和 Ⅲ由同一基因 糖 ,也具有半乳糖苷的转移作用. 通常用以分解乳 bgaA 编码 ,乳糖酶 Ⅰ由 bgaB 编码 ,并且是 3 种乳 糖 ,提高牛奶的可消化性 , 防治炼乳和冰淇淋中乳 糖酶中最耐热的一种 ,在 70 ℃仍可具稳定性[1 ] . 糖的析出.