农杆菌介导pta和sb 401基因共转化水稻的研究.pdfVIP

每 北蓐 让 学报 2009，18(2)：79—82 ActaAgriculturaeBoreali—occidentalisSinica A Studyonptaand sb401GenesCo-transformation ofRiceviaAgrobacteriumtumefaciens QIDengfeng ，ZOU Liangping ，LIPing ，WANGShiquan ， LIShuangcheng andYIN Fuqiang (1．Tarim Unicersity，AlaerXinjiang843300，China，2．RiceResearchInstituteofSichuan AgriculturalUniversity，WenjiangSichuan611130，China) Abstract：Theptaandsb401genesweresimultaneouslytransferredtoriceinthisstudy．Eighteenpos— itivetransgenicplantswereidentifiedbyPCR．Southern blotassaysfortransgenicplantsindicated thatthetwotargetgeneshavesuccessfully been introducedandCO—integrated intothegenomeofthe receptors．RT—PCR analysesdemonstratedtheptagenehasexpressedatthetranscriptionleve1．The testoflysineandtotalproteincontentinmatureseedsshowedthat，compared tothenon—transgenic ricecontrol，thecontentoflysineandtotalprotein hasrespectivelyincreasedby8．48～ 34．35and 4．55～32．74percent．Theresultsconfirmedthatthesb401genehasexpressedatthetranslationlevel inriceseeds． Keywords：Pinelliatenataagglutiningene (pta)；Lysine—richproteingene(sb401)；Lysinecontent CLCnumber：S511．9 Documentcode：A ArticleID：】004—1389(2009)02一OO79—04 农杆菌介导pta和sb401基因共转化水稻的研究 起登凤 ，邹 良平 ，李 平 ¨，王世全 ，李双成。，尹福强 (1．塔里木大学植物科技学院，新疆阿拉尔 843300；2．四川农业大学水稻研究所 ，四川成都 611130) 摘 要 ：利用农杆菌介导法 ，将半夏凝集素(pta)基 因和高赖氨酸蛋白(sb401)基 因导入水稻中，经潮霉素抗 性筛选 ，得到 7O株独立再生植株。通过 PCR检测 ，从中筛选出 18株转基 因植株 。对这些转基因植株当代进 行 Southernblotting分析表明：pta基 因和sb401基 因已经共转化并整和到受体基因组中。对转基 因植株后 代的叶片进行 RT—PCR分析表 明：pta基 因在转录水平上得到了有效的表达。测定 1O株 T。转基因植株成熟 种子的赖氨酸和总蛋 白质量分数表明，与对照相 比，赖氨酸和总蛋 白的提高率分别为 8．48 ～35．34％和 4．55 ～32．74 ，表明 sb401基 因在大部分转基 因植株成熟种子中的蛋 白质水平上得到了比较有效的表达 。 关键词 ：半夏凝集素基因；高赖氨酸蛋白基 因；赖氨酸含量 Rice(OryzasativaL．)iSoneoftheworld’ pestandimprovingthelysinecontentofriceby Smostimportantfoodcrops，butthep