生物负荷对紫外线灭活枯草芽孢杆菌的影响.pdfVIP

科 l技 {论 【坛 生物负荷对紫外线灭活枯草芽孢杆菌的影响 孙兴滨 。 李国峰 ’ (1、东北林业大学环境科学系，黑龙江 哈尔滨 150040 2、哈尔滨工业大学市政与环境工程学院，黑龙江 哈尔滨 150090) 摘 要：使用一套密闭式紫外线消毒装置，生物负荷取 10cfu／mL和 l(Pefum／L2个数量级。将水样引入到紫外消毒装置中，水层厚度和照射功率 一 定，于不同的照射时间取样培养。试验结果表明，使用紫外线灭活枯草芽孢杆菌，灭活率随着生物负荷的增加而增加。 关键词：紫外线消毒；枯草芽孢杆菌；生物负荷 芽孢是细菌在它的生活史中的某个阶段 2结果与分轿 或某些细菌在它遇到外界不良环境时，在其细 按照一定的生物负荷配制好消毒水样 ，生 胞内形成一个内生孢子。芽孢对小 良环境如：高 物负荷取 10cfu／mL和 104cfum／L2个数量级。 温、低温、干燥、光线和化学药物有很强的抵抗 将水样引入到紫外消毒装置中，水层厚度和照 力。以枯草芽孢杆菌作为紫外线高度抗性的代 射功率一定，于不同的照射时间取样培养 ，取 表性微生物进行紫外线灭活试验，考察生物负 样时间点选取 2s、5s、10s、15s、20s、30s、40s、50s 荷对紫外线灭活枯草芽孢杆菌的影响。 和60s。取样后立即涂布平皿 ，于37％恒温培养 1实验材料和仪器试剂 箱中培养24h后计数，比较灭活效果。 枯草芽孢杆菌的分离与纯化 图1所示为小同的生物负荷条件下枯草 线 1．1标本来源 芽孢杆菌的灭活曲线。由图可知，随着生物负 菜园泥土 荷的增加，芽孢杆菌的存活数也随之增加。但 1．2分离方法和鉴定 是，芽孢杆菌在灭活初期没有达到很好的灭活 取土壤 1g，加于盛有 100mL无菌水和 |卜 效果，枯草芽孢杆菌进入 “拖尾”区需要的时间 几颗小玻璃珠的三角瓶中，振荡 15min，静置 较长。在照射时间为 20s即紫外线剂量达到 30min待悬液澄清，取约50mL悬液加人到 角 1800uW·s／era 时，三种生物负荷条件下的芽胞 瓶中置于80oC恒温水浴加热 25min，以便杀死 杆菌的对数存活数分别从3．35、4．16和 4．63减 芽孢杆菌之外的其他细菌。加热完毕立即冷却， 少到 1．88、1．58和 2．1；而当照射时间达到 60s 吸取 5mL悬液接种于装有 100mL增菌培养基 时，这一数值就分别减少到0．92、1．10和 1．34。图 2 的三角瓶中，置于 37℃恒温培养箱培养 24ho用 在照射时间为 60s时，生物负荷在 3～5之间样 划线分离法将过夜培养的细菌接种于固体分离 品的对数存活数都减少到了1左右。 了相关的试验研究。结果发现，当紫外线辐照时 培养基上，37℃培养 24～48h。取培养菌落涂 图2所示为灭活率一照射时间曲线 ，从灭 间相同时，水层越溥，存活的细菌数量越少。灭 片、革兰氏染色和芽孢染色。 活率方面来看也可以证明上述观点。从图上可 活效果越好。而且这种现象在短辐照时间条件 分离所得细菌革兰氏染色阳性．芽孢处于 知，对数生物负荷为4．6和 4．1的两个样品的灭 下尤为明显：当水层厚度很薄时，辐照时间对灭 中间位置，不膨胀；在琼脂培养基上菌落形状不 活率增加得较快，照射时间为 20s时，灭活率就 活效果的影响不是很大；当水层比较厚时，需要 规则，有皱纹，不透明；液体培养时，液面上生长 分别达到了99．70％和 99．74％；而负荷最低的 延长紫外线辐照时间以达到灭活效果。的研究 一 层皱褶的菌膜，为好氧特性。以上结果表明， 3．35的灭活率也达到了96．61％。当照射时间增 属于第一种情况，即水层厚度很薄，在很短的辐 分离细菌生物学特性与枯草芽孢杆菌 (Bacillus 加到60s的时候，三个样品的灭活率分别达到 照时间下就取得很好的灭活效果。灭活效果