低温对不同基因型黄瓜叶片蛋白质组影响.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(2):588-596 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.02.025 低温对不同基因型黄瓜叶片蛋白质组的影响 1 1 1 2 1 许培磊 ，白吉刚 ，王秀娟 ，宗成顺 ，田 明 1 2 （山东农业大学生命科学学院/作物生物学国家重点实验室，山东泰安 271018 ； 山东烟台莱州市农业局，山东烟台 261400 ） 摘要：【目的】分离不同基因型黄瓜叶片的低温诱导蛋白，为从蛋白质组角度揭示黄瓜应答低温逆境的调控 机制打下基础。【方法】以黄瓜（ Cucumis sativus L.）的日光温室品种‘新泰密刺’和露地栽培品种‘津研4号’ 为试材，采用分步提取法溶解叶片总蛋白质，运用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳、质谱分析与检索技术， 在100 μmol·m-2 -1 ·s 的光照条件下，比较研究低温（15/15℃）和常温（25/18℃）下叶片蛋白质组的差异。【结果】 利用提取液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分步提取叶片总蛋白质后，提取液Ⅰ溶解的黄瓜蛋白质较少。对提取液Ⅱ和Ⅲ溶解的叶片 蛋白质进行双向电泳后发现，相对于常温处理，低温使‘新泰密刺’的 7 个蛋白质点特异表达、2 个蛋白质点上 调表达、2个蛋白质点下调表达、5个蛋白质点未表达；使‘津研4号’的7个蛋白质点特异表达、1个蛋白质点 上调表达、4 个蛋白质点下调表达、9 个蛋白质点未表达。低温下， ‘新泰密刺’的蛋白质点 3 和 4 以及‘津研 4 号’中蛋白质点2的表达量显著高于常温处理，通过MALDI-TOF质谱分析，这3个蛋白质点被鉴定为1,5-二磷酸 核酮糖羧化酶的大亚基。【结论】黄瓜叶片的高亲水性蛋白质含量低；在相同的光照（100 μmol·m-2 -1 ·s ）条件下低 温对不同基因型黄瓜叶片的蛋白质组均有影响；1,5-二磷酸核酮糖羧化酶可能与黄瓜叶片耐低温有关。 关键词：黄瓜；蛋白质组；低温；双向电泳；质谱分析；1，5-二磷酸核酮糖羧化酶 Effects of Low Temperature on Leaf Proteome from Cucumis sativus of Different Genotypes 1 1 1 2 1 XU Pei-lei , BAI Ji-gang , WANG Xiu-juan , ZONG Cheng-shun , TIAN Ming 1 ( State Key Laboratory of Crop Biology/College of Life Sciences, Shandong Agricultural University, Tai’an 271018, Shandong; 2Laizhou Agricultural Bureau, Yantai 261400, Shandong)