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分子技术在食品毒理学中的应用 姓名：王媛 专业：食品营养与检测 学号：1110605045 分子技术在食品毒理学中的应用 摘要：本文主要对动物转基因技术发展状况作了概述，重点是近年发展的提高转基因效率的非定点整合转基因方法, 如睾丸转基因法和卵巢转基因法; 提高转基因精确性的定点整合转基因的基因打靶法作了介绍。然后对转基因技术的应用作了论述，最后对转基因技术的发展前景作了展望。 关键字：动物转基因技术；应用；展望 1 分子毒理学 由于分子毒理学是从毒理学分支出来的，它与毒理学其它各学科的关系令人关注。分子毒理学与生化毒理学的关系十分密切，有时几乎难以区分，但前者侧重于研究基因及其表达的负面效应，而后者则侧重于外源化合物的代谢。分子毒理学与药`学的关系尤其是分子药理学的关系密切，两者在研究方法上大体是同样的，不过，分子药理学是研究药物的治疗作用，而分子毒理学则是研究外源化合物的有害效应。由于毒理学的研究范围并不局限于生物个体，尤其是人类的个体，而已扩大到对群体的研究，例如外源化合物对生物群体影响的研究，例如外源化合物对生物群体影响的研究，即生态分子毒理学，又如外源化合物对人群的健康影响的研究，即分子流行病学。 2 分子毒理学的发展 随着分子生物学的迅猛发展，分子毒理学成为近年来毒理学领域进展最快的分支学科，研究进展迅速。分子生物学新技术的开发和应用，如基因重组和克隆技术、核酸杂交技术、PCR技术、DNA测序技术以及一系列突变检测技术已广泛用于外源化合物引起的DNA损害、基因突变、加合物形成、基因多态性、癌基因与抑癌基因的检测等。 近20年来，物理、化学、数学、信息科学、环境科学和生物医学互相渗透，特别是分子生物学新概念和新技术的飞速发展，使人类对“疾病”的本质有了进一步深入的了解。随着人类基因组计划（HGP）以出人意料的速度发展，环境基因组计划（EGP）也在顺利进行，一些新技术，如差异显示技术、荧光原位杂交技术、流式细胞计技术、单细胞凝胶电泳以及穿梭质粒、转基因动物和转基因细胞等得到了充分的开发和应用，将为毒理学工作者提供全新的概念和技术，也为分子毒理学的研究带来新的启迪和前所未有的机遇。 在基因测定方面，由于生物芯片技术日益广泛的应用，使外源化合物诱发的基因变化，可以一步到位就能将整套改变扫描出来。借助于高通量的生物芯片和微阵列技术以及蛋白质、氨基酸电泳质谱技术，化学毒物早期敏感生物效应的标志物监测将快速、高效地进行，及时向人类提出预警信号。 3 转基因动物试验 3.1定将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术称之为转基因技术。通俗的讲：转基因技术就是指利用分子生物学技术，将某些生物的基因转移到其它物种中，改造生物的遗传物质，使遗传物质得到改造的生物在性状、营养和消费品质等方面向人类需要的目标转变。人们常说的遗传工程、基因工程、遗传转化均为转基因的同义词[1]。 常用技术 ② 胚胎干细胞介导技术 胚胎干细胞是从早期胚胎的内细胞团分离出来多潜能细胞系，它具有与胚胎细胞相似的形态特征及分化潜能。当将胚胎干细胞注入受体胚体时，能参与各种组织、器官的发育，形成嵌合体。因此，它可作为一种载体，把外源基因导入个体，获得转基因动物。目前利用胚胎干细胞获得的转基因小鼠主要用于基础研究。 ③ 反转录病毒载体法 反转录病毒的核酸为一条单链的RNA分子，当其进入细胞后，在反转录酶作用下，病毒RNA反转录为双链DNA分子，整合到细胞核基因组中。随着分子病毒学研究的深入，发现利用反转录病毒的高效感染和在宿主细胞DNA上的高度整合特性，可以大大提高基因转移效率。在各种基因转移方法中，通过反转录病毒载体把基因整合到受体细胞核基因组中是最有效方法之一。 ④ 其他 动物转基因技术还有脂质体介导法、电脉冲介导法、原生殖细胞介导法、细胞融合发等。 3.3 转基因动物技术的应用现状 转基因动物是指通过转基因技术将外源基因导入动物生殖细胞,由此稳定整合到动物基因组,并能遗传给后代的动物。目前,转基因动物的研究主要包括三个方面: (1)利用转基因技术进行动物生产改良,培育新品种和提高生产性能,进行基因治疗。 (2)利用转基因动物制造具有生物活性的产物,包括器官移植和生物反应器。 (3)利用转基因动物确定研究手段,包括建立疾病模型和发育调控。 3.3.1 促进动物生长 生长激素(GH)基因是转基因研究中最早运用的,至今已生产出转基因家禽、啮齿类、鱼类、昆虫等多种属性的动物。Hammer等[10](1985)利用显微注射法将人生长激素基因转移到兔、绵羊和猪中均获得成功。国内外大量的转基因家畜GH均能表达,但GH的表达水平在不同的转基因实验之间和同一转基因实验的不同动物个体之