金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究.pdfVIP

维普资讯 园 艺 学 报 2007，34 (5)：1129—1134 AetaHorticulturaeSinica 金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究 李林光 ，何 平 ，欧春青 ， 李慧峰 ，张志宏 (沈阳农业大学园艺学院，沈阳110161； 山东省果树研究所 ，山东泰安 271000) 摘 要：以自然授粉的 金‘冠’苹果种子为材料，研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和 嵌合体分离方法。结果表明：将完整胚在0．5％秋水仙素+1％二甲基亚砜的混合溶液 中暗处理48h，然后 接种在Ms+TDZ1．0mg·L +IBA0．5mg·L +蔗糖30g·L +琼脂6g·L 的再生培养基中，变异 率高达 10．6％。与二倍体相比，四倍体试管苗生长缓慢，节间变短，叶片增大 ，叶形指数趋小化，气孑L密 度降低 ，保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析 DNA含量，表明多数变异植株为同 质四倍体。利用叶片离体再生器官技术 ，从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。 关键词：苹果；秋水仙素；离体诱导；多倍体 ；四倍体；嵌合体分离；多倍体育种 中图分类号：S661．1 文献标识码：A 文章编号 ：0513—353X (2007)05—1129-06 ／n Vitro Induction ofTetraploid from Mature Embryosof ‘Golden Deli- cious’Apple LILin-guang一 ，HE Ping ，OU Chun．qing ，LIHui．feng andZHANG Zhi．hong ， (CollegeofHorticulture，ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang110161，China；ShandongInstituteofPomology，Taian， Shandong271000，China) Abstract：Invitroinductionoftetraploidinappleandthetechniqueofchimeraseparationwerestudied bytreatingopen-pollinatedmatureseedsofGoldenDeliciouswithcolchicine．Themostefficientconditionfor inducingtetraploidsseemed tobetreating embryoswith thesolution includingof0．5％ colchicineand 1％ dimethylsulfoBeindarknessfor48hours，andthen inoculationonMSmedium supplementedwithTDZ 1 ． 0 mg。L～ ，IBA 0．5mg ·L～ ，sucrose30 g ·L～andagar6g ·L～ ．with10．6％ mutationrate ． Compared withthediploid，thetetraploidplantsgrew slowly，withshorterinternode largerleaveswithlargerguardcell ， andlowerdensityofstomata，andsmallerleafshapeindex．Verification ofchromos